摘要：目的:研究靶向甲基化转移酶1(DNMT1)基因的Stealth核糖核苷酸干扰(RNAi)技术对胰腺癌细胞Panc-1中DNMT1表达的抑制作用。方法:通过Block-IT TMRNAi Designer在线设计合成针对DNMT1的Stealth核糖核苷酸(siRNA),以50 nM siRNA用脂质体转染法转染Panc-1细胞。同时设空白对照组,RNAi阴性对照组,荧光RNAi组,每组3个复孔;在转染24 h、48 h、72 h后用荧光显微镜观察转染效率,以48 h荧光强度最亮。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DMNT1信使核糖核酸(mRNA)含量,免疫印迹(Westem blot)检测DNMT1蛋白的表达。结果:将靶向DNMT1基因Stealth RNAi转染到胰腺癌细胞Panc-1中后,Panc-1细胞在转染RNAi后48 h的转染效率为50%～60%;DNMT1的蛋白和mRNA水平显著下调,与对照组相比,转染后48 h的相对抑制率分别为68%和67.8%(P<0.05),也显著低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。结论:DNMT1靶向的Stealth RNA瞬时转染到胰腺癌细胞Panc-1中可显著沉默DNMT1的基因和蛋白的表达,为胰腺癌的基因治疗提供新的理论依据。

摘要：目的研究营养支持对有营养风险的胃肠病患者的临床结局影响，并初步收集成本一效果有关信息，对成本一效果比进行初步探讨。方法本研究为前瞻性队列研究设计，采用定点连续抽样，随访记录研究对象整个住院期间的营养支持应用情况、感染性并发症发病和治疗情况、住院天数等方面信息，并收集研究对象住院期间营养支持的直接费用、并发症的诊断和治疗费用。用多因素统计分析方法评估营养支持对感染性并发症的影响。将“无感染性并发症患者比例”作为效果指标，对肠内营养、肠外营养、肠内和肠外联合营养及无营养支持的4个队列进行成本-效果比的初步探讨。结果对有营养风险的患者，接受营养支持群体与未接受营养支持群体相比感染性并发症发病率显著降低（6．8％比19．6％，X^2=9．0，P=0．003），但住院总费用增高（P=0．0001）。肠外营养、肠内营养、肠外营养一肠内营养联合应用以及未使用营养支持队列，经多因素调整后的成本分别是5635、1212、5220和1339元，而“无感染性并发症患者比例”分别是92．3％、96．4％、91．9％和80．4％。肠外营养、肠内营养和肠外营养．肠内营养支持与无营养支持队列相比，增量成本效果比分别为36101、-794及33748元。结论对有营养风险的胃肠病患者接受营养支持有助于改善患者结局。由于本研究收集成本一效果比有关数据的范围不够，无法通过“广义估计方程”对可能影响结果的因素进行调整，其结果不符合卫生经济学的全面要求，不能直接引用。本初步结果尚需收集更多成本一效果比方面数据的临床研究来校正和补充。

摘要：目的探讨临床缓解期或轻度活动期克罗恩病患者在长程随访中因病住院的影响因素。方法采用前瞻性队列研究设计,选择2013年8月5日至2015年1月5日就诊于北京协和医院消化内科的临床缓解期或轻度活动期克罗恩病患者123例,收集所有患者的基线资料,包括年龄和性别等一般资料,是否有(包括曾有或现有)肠外表现或并发症、糖皮质激素使用效果、超敏C反应蛋白(hsCRP)、血白蛋白等临床资料,以及炎症性肠病生命质量问卷(IBDQ)总分及其全身维度评分等。对所有患者进行长程随访直至2022年5月31日或因病住院。采用受试者操作特征曲线(ROC)分析hsCRP、血白蛋白等预测因病住院的最佳截断值。采用多因素Cox回归模型分析克罗恩病患者因病住院的影响因素。结果123例患者的中位年龄为32.0岁(25.0岁,49.0岁),女性占32.5%(40/123);71例(57.7%)患者因病住院,中位随访时间为29.2个月(9.0个月,57.9个月)。ROC分析显示,hsCRP、血白蛋白预测克罗恩病患者因病住院的最佳截断值分别为1.5 mg/L、40 g/L(均P<0.001)。多因素Cox回归模型分析结果显示,有肠外表现[HR=1.869,95%置信区间(95%CI)1.014~3.443]、有并发症(HR=2.511,95%CI 1.368~4.608)、糖皮质激素无效或依赖(HR=1.958,95%CI 1.128~3.396)、血hsCRP≥1.5 mg/L(HR=2.116,95%CI 1.111~4.029)、血白蛋白≤40 g/L(HR=3.040,95%CI 1.716~5.386)是克罗恩病患者因病住院的独立危险因素(P=0.045、0.003、0.017、0.023、<0.001),IBDQ全身维度评分(HR=0.873,95%CI 0.805~0.948)是因病住院的独立保护因素(P=0.001)。结论有肠外表现、有并发症、糖皮质激素无效或依赖、血hsCRP≥1.5 mg/L、血白蛋白≤40 g/L的临床缓解期或轻度活动期克罗恩病患者是因病住院的高风险人群,需给予更积极的治疗和紧密随访。IBDQ全身维度评分更高的克罗恩病患者病情更稳定。

摘要：目的:观察HDV核酶对人肝癌细胞端粒酶RNA组分的阻断作用。材料与方法:人工设计和合成了HDV核酶的序列,构建体外转录载体***。提取人肝癌7402细胞端粒酶cDNA序列并构建体外转录质粒PGEM hTR。将上述质粒转录,测定了不同条件下HDV核酶对端粒酶的切割效力及其动力常数Kcat,Km及Kcat/Km的值。结果:核酶对底物的最大剪切效率为70.4％。在同一种离子存在的条件下,Km随温度而升高,Kcat则始终在0.71～1.3/min之间波动。结论:HDV核酶(***57)对人肝癌细胞端粒酶 RNA组分具有体外切割效力,其可以用来切割端粒酶等异源性RNA分子,可作为潜在的肿瘤治疗抑制剂。

摘要：目的评价内镜超声检查(endoscopic ultrasonography,EUS)在自身免疫性胰腺炎和胰腺癌鉴别诊断中的价值。方法2013年1月—2018年12月在北京协和医院因梗阻性黄疸初次就诊并确诊,且同时接受EUS的133例自身免疫性胰腺炎和113例胰腺癌患者资料纳入回顾性分析,根据随机号码按1∶1随机分成训练样本和验证样本。在训练样本,将两种疾病患者的10项EUS图像特征进行多因素Logistic逐步回归和受试者工作特征曲线分析,比较两者EUS特征表现的差异,构建自身免疫性胰腺炎与胰腺癌鉴别的预测模型,然后在验证样本检验其预测效能。鉴于胰腺实质弥漫或局灶回声减低判定上存在一定主观性,为避免偏倚,本研究特此设计了2个预测模型。结果Logistic逐步回归多因素分析显示,胰腺弥漫性回声减低(OR=591.0,95%CI:98.8~>999.9,P999.9,P999.9,P=0.004)、胆管壁增厚(OR=35.4,95%CI:3.7~>999.9,P=0.009)、淋巴结肿大(OR=16.8,95%CI:1.7~475.2,P=0.038)以及血管侵犯(OR=22.7,95%CI:2.0~725.7,P=0.028)是鉴别两者有统计学意义的预测因子。2个模型鉴别自身免疫性胰腺炎与胰腺癌的受试者工作特征曲线下面积分别为0.995和0.979。当取最佳诊断阈值时,2个模型的预测灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值均>90%;对于鉴别困难的局灶型自身免疫性胰腺炎与胰腺癌,2个模型的灵敏度和准确率均>90%,特异度、阳性预测值和阴性预测值均>85%。结论本研究构建的2个模型对于自身免疫性胰腺炎与胰腺癌鉴别的预测价值较高,根据EUS特征表现对自身免疫性胰腺炎与胰腺癌作出鉴别是可行的。

摘要：目的调查以问题为基础的教学(PBL)应用于北京协和医院消化内科临床科研实践教学中的效果,讨论目前的科研训练所存在的问题,探索更高效的科研训练模式。方法对参与本次消化内科PBL-临床科研带教的19名见习和实习医师进行问卷调查,对问卷结果进行描述性分析,对培训前后的差异问题进一步做统计分析。结果经过本项目培训,新增加6人首次参与科研活动。相比培训前,学生对于临床科研的兴趣更高,认为临床科研的难度更小;57.89%的学生希望通过科研训练提升论文撰写的能力;36.84%的学生希望提升实验设计的能力;受训学生认为本次科研训练对这两方面的能力提升都有很大帮助。在科研产出方面,受训学生已有23篇论文在项目过程中被正式接收或发表,其中有SCI论文2篇,国内核心期刊20篇。结论学生经过PBL-临床科研带教,在科研产出和科研能力方面都有所提高,但在效果评估和进一步的执行上仍旧存在问题。面临医学专业对于学生科研能力要求的日益提高,需要进一步探索更高效、更具可行性的临床科研教学模式。

摘要：目的调查八年制临床医学专业学生对科研的认知、科研训练经历以及对自身科研能力的评价,了解医学生的科研训练需求,评估目前科研训练的效果,探索更高效的科研训练模式。方法对北京协和医学院2012级、2013级八年制临床医学专业64名学生进行相关内容的问卷调查,对问题结果进行描述性分析,进一步对两个年级间的调查结果进行统计分析。结果北京协和医学院八年制医学生普遍认为在临床学习阶段临床知识和技能比科研能力培养更为重要;提高科研能力和做出科研成果是学生现阶段参加科研训练的主要动机;68.8%学生对科研训练感兴趣,希望通过科研训练提升的能力包括论文撰写、实验设计、数据分析、文献检索与阅读和实验技术等;84.5%学生认为科研训练有难度,开展科研训练时的最大阻碍是学业或临床学习任务繁重;82.8%被调查的学生有科研经历,但学生科研成果产出不多;学生对自己的科研素养自我评价普遍较低。结论北京协和医学院八年制临床医学生对科研兴趣浓厚,但面临诸多困难,通过教学制度的改革,因材施教,将有助于临床医学生的科研能力、科研素养的提高。