摘要：本试验旨在探究视黄酸(RA)对夏季高温期公猪精液品质的影响及相关分子机制。在夏季高温期间,选取15头生产性能相似的(500.40±3.90)日龄大白公猪,随机分为3个组,分别RA_(0)组、RA_(5)组和RA_(10)组,每组5头公猪,每头公猪单栏饲喂。对照组(RA_(0)组)饲喂基础饲粮;试验组(RA_(5)组和RA_(10)组)在饲喂基础饲粮的同时,每天分别补饲5和10 mg/kg BW的RA。连续饲喂1周后,连续采集3次精液(每周1次),测定精液品质。为了探究RA影响公猪精液品质的相关分子机制,本研究进一步设计体外组织培养试验,将切块后的睾丸组织块随机分为3组:对照组(CON组)、热处理组(HT组)和热处理+RA处理组(HT+RA组),其中HT+RA组培养基中加入10μmol/L RA,CON组和HT组培养基中不含RA;34℃环境培养24 h后,HT组和HT+RA组转入39℃环境下培养4 h,CON组全程于34℃环境培养。结果表明:1)试验期间猪舍温湿度指数(THI)最低为75.3,提示试验期间公猪处于热应激状态。2)与RA_(0)组相比,RA对公猪精子畸形率的降低具有显著作用(P<0.05),RA_(5)组和RA_(10)组精清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高(P<0.05)。3)在睾丸组织体外培养试验中,与CON组相比,HT组睾丸组织形态受损,生精细胞核显著变小(P<0.05);与HT组相比,HT+RA组睾丸组织形态改善,生精细胞核显著变大(P<0.05)。4)与CON组相比,HT组睾丸组织核因子E2相关因子2(Nrf2)和谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)相对表达量显著提高(P<0.05);与HT组相比,HT+RA组睾丸组织Nrf2相对表达量显著降低(P<0.05)。5)与CON组相比,HT组睾丸组织轻链蛋白3(LC3)、自噬相关基因3(Atg3)和自噬相关基因7(Atg7)相对表达量显著提高(P<0.05),睾丸组织选择性自噬接头蛋白p62(p62)相对表达量显著降低(P<0.05);与HT组相比,HT+RA组睾丸组织LC3和Atg7相对表达量显著降低(P<0.05),睾丸组织p62相对表达量显著提高(P<0.05)。6)与CON组相比,HT组睾丸组织和间隙连接蛋白43(Cx43)相对表达量显著提高(P<0.05);与HT组相比,HT+RA组睾丸组织Cx43相对表达量显著降低(P<0.05)。7)与CON组相比,HT组睾丸组织视黄酸刺激基因8(Stra8)和DNA减数分裂重组酶1(Dmc1)相对表达量显著降低(P<0.05);与HT组相比,HT+RA组睾丸组织Stra8相对表达量显著提高(P<0.05)。综上所述,RA能改善夏季高温期间公猪精子畸形率和精清抗氧化性能,改善体外试验热处理睾丸组织形态,这可能是通过提升睾丸抗氧化性能、降低细胞自噬以及维护血睾屏障完整和正常精子发生实现的。

摘要：试验旨在探讨39℃体外培养时,常温稀释液中添加不同浓度L-精氨酸(L-Arg)对猪精子活力、NO含量及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的影响。首先根据已有专利和文献报道设计了3种稀释液配方:高糖+青霉素钠+硫酸链霉素(M+N组),高糖+庆大霉素硫酸盐(M+Q组),低糖+青霉素钠+链霉素(L+N组),并将商用稀释液设为对照组。使用稀释液重悬后,17℃恒温箱中孵育精子,每隔24 h测定一次活力指标。其次,取成年健康大约克公猪精液(精子活力>70%)离心重悬于自配精液稀释液,分别添加不同浓度L-Arg(0.0、0.5、1.0、2.0 mmol/L)置于39℃下孵育0、2、4 h,分别收集稀释液和精子,利用计算机辅助精子分析方法(computer-assisted sperm analysis,CASA)测定精子活力参数,评估精液稀释液中L-Arg的最适添加浓度。用最适浓度L-Arg处理猪精子,39℃孵育0、2、4 h,收集稀释液和精子,使用CASA分析测定精子活力参数,测定NO含量,利用蛋白免疫荧光定位方法测定精子中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(endotheliale nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达位置,并检测其酶活力,利用qPCR方法测定精子中iNOS mRNA表达水平,明确NOS在精子稀释和复温过程中不同时间点的变化特点。试验结果显示:1)与对照组相比,M+Q组可有效提高精子活力、向前运动比例、快速运动比例及原地摆动比例,降低精子不运动比例,保存效果相对较好。2)39℃体外培养精子2、4 h时,与对照组相比,精液稀释液中添加1 mmol/L和2 mmol/L L-Arg可显著提高精子细胞活力、向前运动比例、快速运动比例及慢速运动比例,显著降低精子原地摆动和不运动比例(P<0.05)。因此,选取1 mmol/L浓度的L-Arg进行后续研究。3)39℃孵育精子2、4 h时,和对照组相比,1.0 mmol/L L-Arg组NO含量呈升高趋势,总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase,TNOS)活力增强,iNOS酶活力显著增强(P<0.01)。试验结果显示,热孵育精子0、4 h时,L-Arg组精子细胞iNOS基因的相对表达显著高于对照组(P<0.01),iNOS和eNOS蛋白表达位置未发生改变。表明L-Arg可能通过减缓猪精子iNOS基因降解,增强NOS酶活力,促进NO的生成,维持精子活力。

摘要：文章利用数值模拟结果分析了上游遮挡物对建筑物屋面光伏阵列风荷载特性的影响。分析结果表明:遮挡物对光伏阵列上的风荷载影响较大;随着遮挡物高度的增加,各光伏板受到的风荷载由升力逐渐转变为压力;当遮挡物与建筑物高度相同时,光伏板受到的风荷载最大,光伏板的最大体型系数约为0.37;遮挡物与建筑物间距的改变对各光伏板的体型系数影响较小。