摘要：以山梨为试材,提取基因组DNA,运用5因素5水平正交实验设计,对SSR反应体系中的DNA模板、Mg2+、Taq酶、dNTPs和引物用量进行优化试验,确立适宜的SSR反应体系。结果表明:20μL反应体系中,模板DNA 10ng、Mg2+(20mmol/L)2.5μL、Taq酶1.25U、dNTPs(10mmol/L)1.0μL、引物(10μmol/L)1.5μL、10×PCR buffer 2.0μL;应用该SSR体系,在引物筛选试验及山梨×"幸水"后代群体中进行扩增,扩增效果较好,证实了该体系的适用性和稳定性。

摘要：依据梨S-RNase基因保守区设计引物,对23个梨品种(类型)基因组进行了PCR扩增、PCR扩增产物克隆、测序和序列比对分析。根据S基因核苷酸序列同源性100%原理,鉴定出20个S等位基因,其中17个S基因与GenBank中已知的Sb,Sc,Sd,Sh,S8,S12,S13,S16,S19,S27,S29,S30,S31,S34,S36,S41,S42-RNases相同;在小香水中鉴定出1个新的S-RNase基因,片段大小为996bp,现已提交Genbank,登录号为FJ490411,暂未定名;寒红梨和早梨18中各有1条S基因没有被鉴别出。在此基础上,确定了20个秋子梨品种(类型)S基因型,分别是:谢花甜(S29S34),山鸭梨(S30S36),苹香梨(SdS31),马蹄黄(S16S19),寒香梨(S12S31),龙香(S12S16),早白(S19S42),八里香(S19S30),尖把子(S27Sh),软把子(S16S36),糖梨(S27S30),酸梨锅子(S19S41),延边大香水(SdS12),南果梨(S13S34),大南果(S13S34),油红(S13S34),小香水(S27Sx),野生类型山梨1(S8S27),山梨3(SbS41),山梨4(ScS42);1个白梨品种大慈梨(S19S27);秋子梨品种寒红梨和沙梨品种早梨18各鉴定出1条S基因,S基因型分别是S27Sx和SdSx。