摘要：目的:设计、验证针对DNA甲基化转移酶3家族同源保守区域的多靶点siRNA,体内、外评价同时沉默DNMT3对肾细胞癌增殖、侵袭能力的影响。方法:基于DNMT3A/3B的同源保守区域,设计制作针对二者同源区域的2对siRNA序列(si DNMT3A/B-1及si DNMT3A/B-2),以Western印迹法验证沉默效率。转染肾细胞癌786-0细胞系后,分别以体外、体内实验验证其对于肾细胞癌增殖、侵袭能力的影响。结果:针对DNMT3A/B同源保守区siRNA序列,能够显著降低DNMT3A及3B的蛋白表达,并可以显著降低786-0细胞划痕迁移、增殖、侵袭能力,其侵袭、增殖关键基因(Ki-67、Vimentin、VEGF、CD31、MMP2)表达显著下调。体内研究证实,敲除组小鼠皮下瘤生长速度显著降低伴总体生存率显著延长(P<0.05),且皮下瘤内侵袭、增殖关键基因表达显著下调(P<0.05)。结论:基于DNMT3同源保守区域可获得多靶点有效siRNA;靶向下调肾细胞癌786-0细胞系DNMT3A及3B表达能够显著降低细胞增殖、侵袭能力;靶向DNMT3是肾细胞癌治疗的潜在靶点。

摘要：本文通过对高职语文教学现状入手,论证了高职语文教学必须与专业学习高度结合的必要性,老师必须了解掌握所教专业的基本知识和基本技能,必须选择合适的教材,必须调整心态、灵活采用教法;必须结合专业搞好整体教学设计,只有这样,才能积极有效地组织好高职语文教学。