摘要：从农药厂活性污泥中,分离到一株能以高效氯氰菊酯为唯一碳源生长的细菌CH7。经生理生化试验和16S rD-NA分析,将菌株CH7鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。采用Box-behnken设计试验、响应面法(response surfacemethodology)优化菌株CH7的降解条件。在最优条件下(29.4°C,pH7.0,接种量0.15g/L),菌株CH7在12d内对100mg/L高效氯氰菊酯的降解率为90%。

摘要：通过室内模拟抗性汰选出抗三氟氯氰菊酯截形叶螨种群。利用蛋白酶 Ｋ 及十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸钠盐等裂解叶螨细胞，提取基因组 Ｄ Ｎ Ａ。参照有关大鼠、果蝇钠通道的核酸序列，设计２５ 、２７ 个核甙酸的引物对，采用聚合酶链反应分别对抗三氟氯氰菊酯种群和敏感种群进行扩增，产物扩增片段为３００ｂｐ 。由扩增结果得知，引物设计合理。

摘要：根据已发表的植酸酶phyA基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术,以黑曲霉N-2总DNA为模板,扩增出不包含假定信号肽序列的phyA基因,将其克隆到pMD18-T载体中,测定其核苷酸序列,并推导其氨基酸序列。该基因全长为1350bp,与已发表的黑曲霉NRRL3135的phyA基因的同源性为92.4%(不计内含子),编码1个含449个氨基酸残基的蛋白质,推导的氨基酸序列同源性为95.1%。将该基因与分泌型载体pPIC9K连接,构建了植酸酶基因的重组酵母表达载体pPIC9K/phyA。

摘要：【目的】萘是一种重要的环境污染物,它在环境中的积累会对人类健康造成危害,生物降解是解决这一问题的有效方法。本实验室保存的施氏假单胞菌YC-YH1对萘具有较强的降解能力,在此基础上,研究和分析菌株对萘的降解特性、环境因素对萘降解率的影响以及代谢产物。【方法】采用单因素实验法研究pH、温度、接种量、萘初始浓度对萘降解率的影响;并在单因素实验结果的基础上,利用Design-Expert 8.0.5软件和Box-Behnken设计对pH、温度、接种量3个影响因素进行响应面优化分析,建立环境因素对萘降解率影响的优化模型。利用LC-MS检测萘降解过程中产生的重要代谢产物,从而推测菌株对萘的代谢途径。【结果】响应面分析结果表明,优化模型极显著(P<0.001),拟合度良好,预测结果可信度高。降解实验证明,在培养温度为32.4°C、pH为7.10、接种量5.74%(体积比)的优化条件下培养3 d即可将浓度为100 mg/L的萘100%降解。LC-MS分析表明,菌株降解萘的过程中,能够被检测到的主要代谢产物有1,2-二羟基萘、水杨酸、邻苯二酚等。【结论】施氏假单胞菌YC-YH1对萘有高的降解效率,pH、温度、接种量3个因素对菌株的降解率有较大影响。利用响应面法优化菌株对萘的降解条件,能够提高YC-YH1菌株对萘的生物降解性能。初步推测菌株YC-YH1对萘的降解是通过水杨酸途径,萘首先被其代谢为1,2-二羟基萘,而后被转化为水杨酸和邻苯二酚,最后进入三羧酸循环被彻底降解。

摘要：旨在分离获得可高效降解对硝基苯酚的海洋细菌,并系统阐明菌株对对硝基苯酚的降解机理。通过唯一碳源法进行富集、驯化和分离获得可降解对硝基苯酚的海洋微生物,通过单因素试验对菌株的环境适应性进行研究,基于代谢中间产物的质谱分析推测菌株降解对硝基苯酚的代谢途径,通过基因克隆获得参与对硝基苯酚降解的基因。分离获得一株可高效降解对硝基苯酚的海洋细菌 RL-JY1,该菌 72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚的降解率为 100%。基于形态学、生理生化特征与 16S rRNA 基因序列分析,确定菌株 RL-JY1 为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。菌株 RL-JY1 在温度为 20、30 和 40℃时,72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚降解率分别为 97.2%、100%和 100%;在初始 pH 为 6.0、7.0、8.0 和 9.0 时,72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚降解率分别为 64.7%、100%、97.2%和 84.2%;在 NaCl 浓度为 0-8%(W/V)之间,72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚的降解率均为 100%,在NaCl 浓度为 10%和 12%时, 72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚的降解率分别为 81.3%和 50.6%。通过代谢中间产物的质谱分析与鉴定,推测了菌株 RL-JY1 对对硝基苯酚的代谢途径为典型的偏苯三酚途径。基于已有报道对硝基苯酚降解相关基因设计引物,从菌株RL-JY1 基因组中克隆获得参与对硝基苯酚向马来酰乙酸转化的基因 pnpABC,序列比对结果表明所获得的 pnpABC 基因与 P. putidaDLL-E4 所报道的序列相似性在 99%以上。对硝基苯酚降解菌 RL-JY1 为恶臭假单胞菌(P. putida),该菌对环境温度、pH 及盐离子浓度具有较好的耐受能力,且通过偏苯三酚途径对对硝基苯酚进行降解,菌株基因组中含有参与对硝基苯酚降解的 pnpABC 基因。