摘要：伪狂犬病病毒EP0基因编码区与病毒长的潜伏相关转录物(LLT)互补,这干扰了EP0基因表达的定量分析。本研究根据新近证实的EP0剪接体的序列,设计合成一对特异性引物,以GAPDH作为内参,建立一种SYBR Green实时荧光定量PCR检测EP0表达。提取PRV感染细胞的总RNA,分析了DNaseⅠ消化处理、不同反转录引物对检测结果的影响,并且利用该方法检测了EP0基因在感染细胞中的表达特征。结果显示:建立的RT-qPCR溶解曲线单一,且重复性好;PRV基因组DNA不影响RT-qPCR的检测,总RNA不经过DNaseⅠ消化可直接用于EP0的表达检测;随机引物比Oligo(dT)更适合用于反转录,能获得更灵敏的EP0检测结果;EP0基因在感染细胞8 h后表达量达到最高。小鼠三叉神经组织EP0定量检测发现LLT启动子缺失病毒与亲本病毒相比表达量明显降低。上述结果显示,本文成功建立了检测伪狂犬病病毒EP0基因快速简便的方法,为EP0基因的研究提供了有力手段。