摘要：建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,简称CymMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,简称ORSV)是蝴蝶兰生产中的主要病毒病害,建立稳定、灵敏的检测体系是进行病毒早期检测和脱毒技术研究的前提。本研究首先对CymMV和ORSV的外壳蛋白(coat protein,简称CP)基因片段进行克隆和序列比对,随后设计特异性引物,分别构建2种病毒的RT-qPCR(real time quantitative PCR,简称RT-qPC)检测体系,并对云南地区20份样品进行检测。研究结果显示,CymMV和ORSV CP基因序列与其他地区分离物中这2种病毒的核苷酸序列相似性分别为97.92%~98.66%和99.12%~99.56%,其CP基因序列具有保守性。CymMV和ORSV在RT-qPCR体系中最低检出浓度分别为30.9、35.0 copies/μL,灵敏度较RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,简称RT-PCR)提高10倍。利用RT-qPCR体系对20份温室样品进行检测,CymMV阳性率为100%,ORSV阳性率为90%,阳性率均高于RT-PCR检测结果。本研究构建的CymMV和ORSV RT-qPCR检测体系将为蝴蝶兰病毒病早期监测和脱毒种苗的培育奠定基础。

摘要：采用正交实验设计L9(34),以MS培养基,分别加入不同质量浓度的6-BA、NAA、ZT和蔗糖进行辣木丛生芽增殖诱导;采用正交实验设计L9(34),以不同基本培养基,不同质量浓度的IBA、NAA进行辣木组培苗不定根诱导。结果表明,MS+蔗糖30 g/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂7 g/L为辣木诱导丛生芽较佳的启动培养基,丛生芽诱导率可达100%;MS+蔗糖30g/L+ZT 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+琼脂7 g/L,为辣木丛生芽增殖较佳的培养基,增殖系数为6.17;1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L,为辣木丛生芽生根较佳的培养基,不定根诱导率可达100%。