摘要：【目的】从一株具有细菌群体感应(Quorum Sensing,QS)信号分子淬灭活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SS6中扩增N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase,Aii A)基因aii ASS6并异源表达,研究此信号降解酶的酶学特性。【方法】设计特异性引物,从*** SS6中克隆N-酰基高丝氨酸内酯酶基因aii ASS6,测序并进行生物信息学分析;将此基因克隆到表达载体p ET28(a),构建重组菌株并提纯目的蛋白Aii ASS6;然后用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析目的蛋白Aii ASS6降解QS信号分子N-(3-Oxooctanoyl)-L-homoserine lactone(OOHL)的酶学特性。【结果】克隆得到基因片段,命名为aii ASS6(Gen Bank:KP125494),其编码一条含有297氨基酸残基的多肽,用p ET28(a)成功构建重组质粒p ET28-aii ASS6。生物信息学分析表明,Aii ASS6的氨基酸序列含有N-酰基高丝氨酸内酯酶典型的"HXHXDH"基序和194位的Tyr残基。在Escherichia coli BL21(DE3)中异源表达Aii ASS6,用Ni柱纯化后,Aii ASS6含量达2.76 mg/m L。HPLC检测结果表明Aii ASS6对OOHL具有很强的催化活性及耐热性,Km和Vmax分别为0.998 mmol/L和22.3 U/mg,最适pH为7.6,最适温度范围为50-90℃;此酶在4℃保存3个月后其残余活性仍达到86%,表现出较强的稳定性。【结论】从*** SS6中获得的QS淬灭酶Aii ASS6表现出降解QS信号分子的高活性,其酶学特性表明它具有作为微生物制剂防控植物或水产养殖中基于QS调控的病原菌毒力的应用潜力。

摘要：【目的】为了探索嗜肺军团菌类真核效应蛋白LegK3的功能,并进一步筛选得到其在宿主细胞内的作用靶点,我们利用酿酒酵母作为替代模型研究LegK3对宿主细胞的毒力效应,并针对其作用途径进行了初步分析。【方法】设计引物完整扩增LegK3、RalF、LidA的ORF,其中已知效应蛋白RalF、LidA基因作为对照实验组;扩增片段与酵母表达载体pESC-HK连接构建成重组载体,转化酿酒酵母菌株W303-1A,使用含2%半乳糖的选择培养基进行诱导培养,分别观察酵母细胞的生长抑制和CPY延迟情况;提取诱导前、后的酵母菌体总蛋白用c-myc抗体检测效应蛋白的表达情况;用anti-PGK、anti-CPY抗体检测酿酒酵母CPY的延迟情况。【结果】表达LegK3的酵母菌株出现了生长抑制的现象,并且CPY的成熟受到延迟影响。【结论】LegK3的异源表达能够抑制酿酒酵母的生长并延迟其囊泡蛋白CPY的成熟,推测LegK3可能通过作用于小泡运输途径来抑制真核宿主细胞的生长和分裂,以维持适合嗜肺军团菌繁殖的稳定胞内环境。

摘要：对市政道路中出现的问题及时地进行维修和管理,能够有效地减少交通拥堵,保证道路的畅通运行,减少建设部门的开支,减少国家和人民的财产损失.目前,国内城市居民的生活安居乐业,私家车的数量与日俱增,城市交通运输也在不断的扩大,道路的设计和管理是非常关键,但是道路施工完成之后,如何保证道路在有限的使用期间内正常运行,保证车辆路上安全,这就需要市政工程的技术人员对其进行合理的维修和养护管理,制定科学的道路维修计划,有序地进行操作.

摘要：背景:目前肌腱修复研究需要解决的问题很多,如肌腱缝合与粘连的机制研究,提高肌腱愈合质量研究,缝合材料与方法的改进,肌腱缝接处的抗张强度研究,组织工程肌腱的生物材料研究等,这些都是影响肌腱修复研究发展的重要问题。目的:通过对汤森路透Web of Science数据库收录2002/2011有关肌腱损伤修复材料相关文献的献计量学分析,评估该领域学术文献的总体趋势,为该领域的深入研究提供参考。设计:文献计量学分析。资料提取:由第一作者以电子检索方式对汤森路透Web of Science数据库2002-01/2011-12肌腱损伤修复材料研究的文献进行分析,采用检索词为"tendon injury(肌腱损伤),material(材料),repair(修复)",对检索的相关文献运用数据库中自带的分析功能和Excel软件绘制图表的功能进行分析,描述其分布特征。入选标准:纳入经同行评议的肌腱损伤修复材料研究已发表的文献,包括研究原著、综述和会议的文献类型。排除:①需采用手工检索和电话检索方式收集的文章。②未正式出版的文章。③在收录数量之外排除勘误类文献类型。主要数据的判定指标:以SCI数据库相关文献出版时间、文献的数量、学科分类、文献类型、发文量较多的作者、来源出版物、会议、发文量较多的机构、国家地区分布、基金资助情况、文献语种和被引频次进行分析。结果:①汤森路透Web of Science数据库过去10年共收录肌腱损伤修复材料研究相关文献156篇。从文献发表数量的趋势上看,总体呈现出逐步上升的状态,2009年收录该领域的相关文献达到顶峰,为28篇。其中研究原著类文章共收录141篇,综述类文章13篇。研究文字的学科领域集中在骨科学和外科学方向,其次为运动科学和工程学。②目前发表量较多的出版物为American Journal of Sports Medicine《美国运动医学杂志》、Foot Ankle International《足与踝国际杂志》和Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery《矫形外科与创伤外科学文献集》。发表文献的国家以美国为主,占全球相关领域发稿量的42.9%。中国在过去10年间被收录文章总量位居第5名,共发表9篇相关文章,占全球相关文章的5.8%。③肌腱损伤修复材料研究相关文献的基金以NIH资助为主。最高被引频次文章主要发表在Journal of Cellular Physiology《细胞生理学杂志》和Cytokine & Growth Factor Reviews《细胞分裂与生长因子评论》等期刊上。结论:文献分析显示,近几年来肌腱损伤修复材料的研究趋于成熟,发文量稳定并且呈逐渐上升趋势,是目前骨科、外科和运动医学领域的研究热点。

摘要：图纸是服务于铁路安全运输的关键数据资源。为弥补既有铁路电务专业信号图纸审核环节的不足,解决现场主要靠人为经验进行图纸校核的模式,设计了一套专用于铁路信号CAD图纸校准核对的智能化平台。通过对铁路电务部门日常图纸校核业务场景的分析,采用标准主流的B/S(Browser/Server)架构设计理念,对审核流程进行优化,为现场人员提供了统一的Web访问门户,实现了信息管理、图纸录入、图纸查看、车站信息维护和图纸校核及图纸实时查询等功能,能够辅助信号工进行图纸复核,提高了现场作业水平,保障了铁路运营安全。

摘要：空冷型质子交换膜燃料电池(Air-Cooling PEMFC)电堆的工作条件中,电堆温度对电堆性能的影响最大,电堆温度的控制直接影响电堆的性能指标。首先分析了空冷型PEMFC电堆的温度特性,通过实验手段获得了电堆的最佳工作温度-电流曲线,并拟合出了经验公式。在此基础上设计了该类电堆的温度控制系统,提出了模糊PID融合控制算法。实验结果表明该温度控制系统具有良好的静态和动态特性,有效地解决了空冷型PEMFC电堆的温度控制问题。

摘要：城中村具有人口组成杂乱、城市规划滞后、市政设施缺陷、用地管理混乱等突出问题,给城中村的改造建设带来极大挑战。"以水为财"的风水塘,作为岭南水乡传统生活习俗的一部分,随着社会变迁及城市化不断推进发展,污水直排、管网渗漏、面源污染等问题日益突出,导致风水塘的景观功能不断丧失而逐渐沦为"臭水塘",风水塘的截污治理成为城中村改造的重要工作。以广州市天河区棠下街道棠东村风水塘截污工程为例,综合采用垃圾分类清理、面源污染截流、岸壁加固修复、直排污水引流、渗流污水疏导、渗漏污水生态净化等多种技术手段,对广州市城中村风水塘截污方法进行有益探索,以期为区域风水塘截污工程提供借鉴参考。

摘要：为适应基于大类招生的本科培养模式,提高教学质量,中山大学生命科学大学院在"寓教于研、寓学于研"教学理念的指导下,根据本院师生比高、科研力量雄厚的特点,通过比较国内外同类院校的课程体系,以"厚基础、宽口径、保证主干、丰富选修、突出实践"为主要原则对本院的课程体系进行了设计。经4年多的实践,教学改革取得了初步的成效,为进一步改进本院的课程体系和教学管理模式提供了参考。

摘要：教师专业化发展与《体育与健康》课程标准改革等对中小学体育教师素质提出了新的要求,为适应此要求,加强在校体育教育专业专科学生教学设计能力的培养成为必然.从理论课程教学内容的整合优化、理论与技术课程教学理念转变和教学模式改革、教学设计比赛和教育见习实习的相互促进等方面进行探索.