摘要：设计了以内参照为基础的竞争性聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，同时定量检测ＨＢｅＡｇ阴性的慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因前Ｃ区野毒株及变异株，并观察了在应用α干扰素（ＩＦＮ）治疗以后的变化。结果发现干扰素治疗有效者中，病毒核酸量迅速下降至转阴；而干扰素治疗无效者中，病毒核酸量也可有所下降，但仍高于检测水平甚至反跳；另外，野毒株对ＩＦＮ的反应似乎优于突变株。该方法可用于研究乙型肝炎病毒感染过程及考核抗病毒药物疗效。

摘要：目的　建立一种在拉米夫啶治疗过程中的聚合酶酪氨酸 蛋氨酸 天冬氨酸 天冬氨酸(YMDD)基序变异的检测方法。方法　根据寡核苷酸探针与模板结合时 ,不匹配碱基显著影响熔解温度的原理 ,设计合成 2条荧光标记的特异性探针 ,用实时荧光聚合酶链反应 (PCR)方法对 2 97例患者的 35 4份标本进行YMDD变异检测。结果　 35 4份标本中 ,检出YMDD变异株 15 6份 ( 44 1% ) ,其中混合株占 34% ( 5 3/15 6 ) ;有 9份血清标本同时进行了DNA序列分析 ,测序结果同本试验检测的结果完全一致 ;同时发现YMDD变异与血清谷丙氨酸转氨酶异常相关 (P <0 0 1)。结论　本研究建立的实时荧光PCR方法简便、快速、灵敏、经济 ,可用于临床拉米夫啶治疗中YMDD变异的检测。

摘要：自上海市及江苏省慢性丙型肝炎患者血清中分离丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，采用自行设计的引物，经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），获得长为６９４ｂｐ的Ｃ３３ｃ抗原基因ｃＤＮＡ，将其克隆于表达载体并作序列分析。结果表明，上海株ＨＣＶ－Ｓ１及江苏株ＨＣＶ－Ｓ２该区域核苷酸水平有很高的同源性（＞９９％），上海及江苏株ＨＣＶ与美国原型ＨＣＶ－１、日本株ＨＣＶ－Ｊ及河北株ＨＣＶ－ＨＢ在该区域核苷酸水平的差异分别为１８．６４％、５．５５％及８．０１％～８．１７％，氨基酸水平的差异在２．３１％～６．０２％之间。上海株同一份血清三个独立克隆间核苷酸水平有０．６％～０．９％的差异。本实验为进一步表达Ｃ３３ｃ蛋白作好了准备。

摘要：本研究设计并合成了丙型肝炎病毒核心区相关抗原—ＣＰ９和ＧＯＲ二段肽，介绍了固相合成肽方法及纯化过程，经鉴定在高压液相柱及ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳上均一。为了制备多肽抗血清，于多肽上连接蛋白质（ＢＳＡ），并采用微量免疫方法获得了高效价免疫血清—抗ＣＰ９和抗ＧＯＲ。这在合成肽和多肽抗体的制备上具有一定意义。

摘要：目的建立拉米夫定治疗过程中乙型肝炎病毒多聚酶变异的检测方法，对该部位变异类型、发生率及其与病毒滴度的关系进行初步分析。方法拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者164例，在其中治疗64周时HBVDNA阳性的101份血清中，选择9份血清进行分析。设计台成一对引物SI、A1，采用聚台酶链反应法扩增得到包括YMDD基序（motif）的部分P区基因，片断长926bp，对扩增片断的部分校苷酸（约500bp）进行序列分析。HBVDNA定量用分枝DNA信号扩增祛。结果在9例患者中，发现YMDD（酪氨酸－蛋氨酸－天门冬氨酸－天门冬氨酸）基序变异的5例，占56％，其中M（蛋氨酸）－I（异亮氨酸）3例，M（蛋氨酸）－V（缬氨酸）2例，后者合并D（天门冬氨酸）→G（甘氨酸）变异1例。在2例血清HBVDNA低滴度（＜100MEq／ml）患者中未发现YMDD基序变异，7例中、高滴度（＞300ME／ml）患者中5例发现YMDD基序变异，占71％。结论拉米夫定是一种新的治疗慢性乙肝较有潜力的抗病毒药物，若能在治疗过程中对HBVDNA滴度变化及病毒变异发生进行监测，可指导临床的合理用药及联台用药。

摘要：目的 探讨HCV基因型对慢性丙型肝炎的干扰素(IFN)治疗效果的影响。 方法 采用随机、开放和对照的多中心临床试验设计。208例受试者按1∶1随机分到聚乙二醇干扰素α-2a(Peg-IFN)组和IFN-α-2a组。在治疗之前,用Simmonds基因分型法酶切分型,在治疗24周结束和完成24周的随访后检测患者的ALT和HCV RNA,以HCV RNA的阴转率作为主要评价指标,经ITT人群的统计学分析。 结果 202例患者确定了HCV基因型,基因1型158例(78.2％),非基因1型44例(21.8％)。治疗结束病毒应答率(ETVR)和持续病毒应答率(SVR)基因1型患者分别为53.8％和25.3％,非基因1型患者分别为61.4％和43.2％,SVR两组患者差异有显著性,x2=5.313,P=0.021。Peg-IFN组基因1型和非1型患者的ETVR分别为76.8％和81.0％,SVR分别为35.4％和66.7％,SVR两组患者差异有显著性,x2=6.735,P=0.01。病毒复发率基因1型和非基因1型患者分别为55.6％和23.5％,差异有显著性,x2=5.496,P=0.02。IFN-α-2a组,ETVR和SVR基因1型患者分别为29.0％和14.5％,非基因1型患者分别43.5％和21.7％,差异无显著性。病毒复发率基因1型患者为72.7％,非基因1型患者为50.0%,差异无显著性。 结论 IFN对基因1型丙型肝炎患者的疗效低于非基因1型,HCV基因型主要影响IFN对慢性丙型肝炎的持续应答,也?

摘要：目的　以干扰素α 2a(IFNα 2a ,罗荛愫 ,罗氏 )为对照 ,评估聚乙二醇干扰素α 2a(FEG IFNα 2a ,派罗欣 ,罗氏 )治疗中国慢性丙型肝炎的效果及其安全性和耐受性。方法　采用随机、开放和对照的多中心临床试验设计 ,将 2 0 8例慢性丙型肝炎患者随机分为PEG IFNα 2a组 (10 6例 )和IFNα 2a组 (10 2例 ) ,两组治疗前HCVRNA、基因型等临床资料具有可比性 ,以病毒学应答和生化应答作为疗效的主要评价指标。同时观察患者药物治疗后的不良反应。结果　PEG IFNα 2a组持续性病毒应答率 (SVR)显著高于IFNα 2a组 (分别是 4 1.5 1%和 16 .6 7% ,P <0 .0 0 0 1)。PEG IFNα 2a治疗HCV基因 1型和非基因 1型的SVR显著高于IFNα 2a组 (P =0 .0 0 3) ,PEG IFNα 2a治疗高病毒载量慢性丙型肝炎的SVR明显高于IFNα 2a组 (P =0 .0 0 0 3) ,但是低病毒载量的SVR两组之间差异无显著性 (P =0 .0 5 9)。PEG IFNα 2a与IFNα 2a有相似的不良反应 ,不良反应间差异无显著性 ,两组患者均无发生不良事件。结论　PEG IFNα 2a对慢性丙型肝炎患者的疗效优于传统干扰素IFNα 2a ,在中国慢性丙型肝炎人群中具有较好的安全性和耐受性。

摘要：目的:建立α鄄干扰素(IFN鄄α)信号传导蛋白和基因检测的方法。方法:收集慢性乙型病毒性肝炎、自愈性乙型肝炎病毒感染者、健康对照者的外周静脉血并分离外周血单核细胞(PBMC),建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞系。体外分别用不同浓度的IFN鄄α(0、100、1000、10000IU/ml)刺激细胞,用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测IFN活化的干扰素刺激基因因子3(ISGF鄄3)和γ鄄干扰素活化因子(GAF);设计特异的引物和探针,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IFN诱导抗病毒蛋白MxA、OAS1、PKR的相对表达。结果:成功建立了EBV转化的B淋巴细胞系。建立了EMSA检测ISGF鄄3和GAF转录蛋白的方法,用实时荧光定量PCR能够准确地检测样本中MxA、OAS1和PKR的表达。结论:建立了IFN信号传导蛋白和基因检测的方法,为进一步研究IFN治疗慢性乙型病毒性肝炎的疗效提供依据。

摘要：目的评价国产阿德福韦酯(优贺丁)片10mg/d治疗HBeAg阳性的中国慢性乙型病毒性肝炎患者48周的疗效和安全性。方法采用多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照的研究设计。前12周双盲阶段,240例患者按2:1的比例随机进入优贺丁组(160例)或安慰剂组(80例);12～36周,所有患者均接受开放的优贺丁治疗;36～48周原双盲阶段中接受优贺丁治疗的患者重新按1:3的比例随机分入安慰剂组(A组,40例)或继续优贺丁治疗组(B组,120例),而第一阶段服用安慰剂的患者(C组,80例)在此阶段将继续接受优贺丁治疗。主要疗效评估指标为血清HBV DNA的变化情况,次要疗效评估指标包括:丙氨酸转氨酶(ALT)的复常率、HBeAg阴转率和HBeAg的血清转换率。结果12周时,A、B组HBV DNA中位数水平较基线分别降低2.43和2.54log10拷贝/ml,均显著好于C组(P<0.05);36周时,A、B、C组HBV DNA水平中位数较基线分别降低了3.57、3.24和3.29log10拷贝/ml;48周时,B、C组患者HBVDNA中位数水平分别较基线时下降3.58和3.38log10拷贝/ml,而A组则恢复到7.37log10拷贝/ml。12周时,A、B组HBV DNA转阴率分别为17.50%和25.83%,显著高于C组的1.25%(P分别均<0.01);36周时,A、B、C组HB VDNA转阴率分别为37.50%、26.67%和28.75%,三组间无显著差异(P=0.45);48周时,B、C组HBV DNA转阴率持续升高达到34.17%和31.25%,而A组则降为7.50%。48周时,B、C组ALT复常率持续升高达75.25%和64.06%,A组则由36周时的75.68%降为28.57%;B组HBeAg转阴率和血清转换率分别为6.42%和4.55%。安全性方面,研究期间各治疗组血清肌酐及血磷值平均水平同基线相比无变化。结论优贺丁片10mg/d剂量治疗48周HBeAg阳性的中国慢性乙型肝炎患者有效和安全。