摘要：背景:随着螺旋CT及计算机图像后处理技术的进步,医学仿真影像学在复杂颈椎病的诊断与治疗中获得了良好的临床应用效果。目的:观察脊髓造影螺旋CT扫描多平面重建及三维重建颈椎影像仿真解剖模型的效果及其临床意义。设计、时间及地点:计算机三维重建,金标准对比实验,于2001-01/2006-01在苏州大学附属第二医院完成。对象:接受手术治疗的20例病情复杂的颈椎病患者。方法:对20例患者进行颈脊髓造影螺旋CT薄层扫描,分别行多平面重建和三维重建,建立颈椎CT仿真解剖模型。将扫描及其重建结果用于术前病情评估、模拟手术,并以手术直视所见为金标准评价仿真解剖模型的准确性和效能。主要观察指标:仿真解剖模型的准确性和效能。结果:仿真解剖模型可同步显示骨性椎管和膜性椎管,为术前评估和模拟手术提供了颈椎全面、细微骨性解剖结构和硬膜囊、脊髓、神经根袖等软组织受压等解剖信息,与患者实际解剖相符合。结论:仿真解剖模型直观、逼真,准确再现了颈椎解剖,可应用于综合评估颈椎病病情并模拟手术。

摘要：背景：细胞移植是脊髓损伤的一种有效治疗手段,嗅鞘细胞被认为是最适合的种子细胞之一,但目前对其培养纯化的方法尚无公认标准。目的：运用改良差速贴壁法＋含同源嗅鞘上清液的无血清条件培养液来纯化培养嗅鞘细胞,以期建立一种新颖、经济、简单、实用的纯化培养成年大鼠嗅鞘细胞的方法。设计、时间和地点：观察性对照实验。实验于2008-02/06在苏州大学干细胞与组织工程实验室完成。材料：健康成年SD大鼠6只,体质量150-180g。方法：①无菌条件取大鼠嗅球组织,消化、离心去除上清液后,用含体积分数为0.2胎牛血清的DMEM/F-12培养基重悬,稀释的单细胞混悬液均分成3份,分别用于单纯改良差速贴壁、单纯无血清条件培养液纯化和改良差速贴壁＋无血清条件培养液纯化的实验。②单纯改良差速贴壁：将单细胞混悬液以8000个/cm^2密度种植于无包被的25cm2培养瓶中。经12h＋24h两次差速培养后,吸出细胞上悬液,计数板计算浓度后,按1×10^9L^-1浓度重新种植于载有多聚赖氨酸包被盖玻片的35mm培养皿中继续培养3周。③单纯无血清条件培养液纯化：将单细胞混悬液用预先收集并制备的含同源嗅鞘培养上清液的无血清条件培养液直接种植于载有多聚赖氨酸包被盖玻片的35mm培养皿中,孵育两三天后再换成含体积分数为0.1胎牛血清DMEM/F12培养基继续培养3周。④改良差速贴壁＋无血清条件培养液纯化：经12h＋24h两次差速纯化,吸出上悬液接种于培养皿中继续培养2.0-3.0d后,改换成无血清条件培养液,孵育36-48h后再换成含体积分数为0.1胎牛血清DMEM/F-12培养基继续培养。以后视情况每3-5d半量换液1次,培养3周。主要观察指标：运用倒置显微镜观察各组不同时间的嗅鞘细胞生长状况和形态学特征。采用GFAP、NGFRp75和Hoechst33258等抗体,于分离培养14d后进行细胞免疫荧光染色并检测嗅鞘细胞的纯度。结果：①倒置显微镜观察：差速后3d内有大量细胞贴壁生长,细胞形态较混杂,辨认嗅鞘细胞较困难。差速后再运用无血清条件培养液2d后,可见纯度较高的典型嗅鞘细胞形态,以双极梭形和多极为主,细胞突起细长。伴少量扁平状＂油煎蛋样＂细胞。继续培养至14d可见细胞立体感及折光性最佳,数量和纯度最高。培养3周后3组细胞开始老化,活力明显下降,成纤维等杂细胞开始挤占原嗅鞘细胞生长空间。②免疫荧光染色显示嗅鞘细胞特异性表达GFAP和NGFRp75,单纯差速后嗅鞘细胞纯度仅有72%-75%,单纯无血清条件培养液纯化后仅为48%-52%,改良差速贴壁＋无血清条件培养液纯化组纯度可达88%-92%。结论：实验建立了完善的成年大鼠嗅鞘细胞培养纯化新方法。