摘要：瑞德西韦是一种具有广谱抗RNA病毒活性的核苷类似物,通过抑制病毒中RNA依赖性的RNA聚合酶活性从而发挥作用。在药物设计中,首先筛选了具有抑制病毒生长活性的核苷类似物,确定了鸟嘌呤类似物和戊糖的基本结构,再对其进行磷酸修饰、前药修饰和实验筛选得到最终结构。在药物合成方面,通过对两代合成路线的对比,讨论了反应条件和手性合成对其合成效率的影响,强调反应条件和立体化学在合成中的重要作用。在应用方面,概要阐述了在各类RNA病毒病治疗中的实验和应用情况。通过上述介绍,以期对瑞德西韦有一个相对全面的认识。

摘要：目的:建立一套简便、对RNA样本起始量要求很低的RNA测序建库方法,在此基础上引入分子条形码技术,从而使RNA-seq的数据所反映的表达丰度更加客观真实。方法:将微量RNA用RNaseⅢ片段化后,利用反转录酶的反转录活性、模板转换活性以及DNA依赖的DNA聚合酶活性,一步实现从RNA到cDNA文库的反应,再通过PCR扩增获得适合测序仪的测序文库,通过测序分析验证建库效果,最后采用荧光定量PCR法测定部分基因的表达量以验证测序结果,同时比较分子条形码的引入对表达量分析的影响。结果:通过电泳观察和测序结果分析,选择Clontech公司的SMARTscribe,反转录和模板转换反应温度设为50℃,反转录完成后经AMPure Beads纯化再经PCR扩增得到测序文库,电泳检测文库DNA长度和浓度符合测序要求。比较发现,用分子条形码建库的测序结果能够更加真实地反应基因的实际表达量。结论:初步建立了针对10 ng RNA样品的RNA-seq建库技术,并在建库方案中加入分子条形码使其测序结果更加真实地反映基因表达量。该技术未来可适用于微量RNA样品的高通量测序。