摘要：数学知识与技能的教育是小学教育阶段的重点教学内容,也是保障学生打造良好学习基础的关键,同时其他科学文化知识的学习也离不开数学的铺垫。小学阶段学生数学素养的良好建立有利于培养学生的逻辑思维能力,促进学生从小锻炼理解力,从而保障学生可以更好的自主学习。结构化教学中课前一练的教学方式是小学低年级教学常用教育手段,一方面有助于促进学生巩固知识内容,另一方面有利于在课堂教学开始前激发学生的求知欲和教学参与性,从而提高数学的课堂教学质量和效率。因此,文章浅析小学数学低年级教学中结构化教学的有效措施,探索课前一练对学生的教学有效性提升,意在促进提高数学教育水平增强学生能力。

摘要：目的·研究抗肿瘤药物依托泊苷对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)成骨分化的促进作用及可能的机制。方法·体外分离C57BL/6J小鼠骨髓和人骨髓来源MSC。给予小鼠MSC不同浓度(0~12.50μmol/L)的依托泊苷12、24、36、48和60 h后,采用CCK-8法检测MSC的增殖活性。采用凋亡检测试剂盒检测依托泊苷(0、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)对大鼠成骨性骨肉瘤细胞系UMR-106凋亡的影响。分别以依托泊苷(0、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)处理小鼠和人MSC(同时诱导成骨分化)、UMR-106细胞,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红染色分析细胞成骨分化情况。通过实时荧光定量PCR技术检测依托泊苷对小鼠MSC成骨分化标志物Alp、骨钙素、Ⅰ型胶原α1链mRNA水平的调控。将0.001μmol/L依托泊苷与UMR-106细胞共孵育后,通过Illumina Xten高通量转录组测序和生物信息学分析,寻找依托泊苷上调的成骨分化相关靶基因,并通过PCR验证。Western blotting检测依托泊苷(0、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)处理的小鼠MSC中成骨特异性转录因子(osterix,OSX)、矮小相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)及DNA结合抑制因子1(inhibitor of DNA binding 1,ID1)的表达变化。结果·依托泊苷对小鼠MSC增殖的影响呈现浓度依赖性;当浓度≥0.20μmol/L时,依托泊苷开始抑制MSC的增殖,48 h的半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC_(50))为2.192μmol/L,60 h的IC_(50)为1.399μmol/L。凋亡检测结果显示依托泊苷浓度为0.001~1μmol/L时UMR-106细胞的凋亡率为16.137%~28.300%。ALP染色、茜素红染色及荧光定量PCR结果显示0.001~0.1μmol/L依托泊苷对小鼠和人MSC以及UMR-106细胞具有促成骨分化的作用。RNA测序分析表明,依托泊苷可上调UMR-106细胞结缔组织生长因子基因表达。Western blotting分析结果显示,0.001、0.01μmol/L依托泊苷显著增加小鼠MSC OSX、RUNX2及ID1的表达。结论·抗肿瘤药物依托泊苷可促进MSC成骨分化,该作用可能与其上调ID1、RUNX2、OSX表达有关。

摘要：根据GeneBank公布的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)美洲型毒株VR-2332序列设计了一对特异性引物P1/P2,扩增片段为508bp,从而建立了检测PRRSV的一步法RT-PCR蛤测方法,特异性试验表明,该引物均不能扩增其它常见的与繁殖障碍有关的病毒基因。敏感性实验表明,该引物可以检测到10-5TC ID50的病毒含量。利用该方法对青海某猪场中20份临床上疑似PRRS的组织进行检测,其中16份样品呈PRRSV阳性结果,阳性率为80%,表明建立的该方法完全可以快速检测组织中的PRRSV。

摘要：利用MDBK细胞从青海省刚察县某藏羊养殖小区发病羊唇部痂皮中分离获得一株病毒,通过临床症状、PCR检测以及组织病理学观察等方法对该株病毒进行了鉴定,证实分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf Virus,ORFV),命名为ORFV-QHGC01。参照Gen Bank中ORFV F1L基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物,对ORFV-QHGC01株F1L基因进行了克隆、测序,并推导出其氨基酸序列。序列分析表明,分离株F1L基因片段长987bp,编码328个氨基酸,与Genbank中AF097215、AY040081、AY040082、AY040083、AY040084、AY040085、FJ808075、HQ221964、JQ271535株的核苷酸序列同源性分别为:96.7%,95.6%,96.1%,96.2%,97.5%,97.2%,96.5%,95.3%,98.3%。系统发育进化树结果表明,ORFV-QHMH01分离株与参考毒株JQ271535的亲缘关系较近,这表明不同地区分离株的F1L基因具有较好的保守性。

摘要：利用MDBK细胞从青海某养殖户发病羊唇部痂皮中分离获得一株病毒,通过临床症状、PCR检测以及组织病理学观察等方法对该株病毒进行了鉴定,证实分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf Virus,ORFV),命名为ORFV-QHMH01。参照GenBank中ORFV F1L基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物,对ORFV-QHMH01株F1L基因进行了克隆、测序,并推导出其氨基酸序列。序列分析表明,分离株F1L基因片段长987bp,编码328个氨基酸,与AF097215、AY040081、AY040082、AY040083、AY040084、AY040085、FJ808075、HM133903、HQ221964、JQ271535株的核苷酸序列同源性分别为:96.7%,95.6%,96.1%,96.2%,97.5%,97.2%,96.5%,48.6%,95.3%,98.3%。系统发育进化树结果表明,ORFV-QHMH01分离株与参考毒株JQ271535和AY040084的亲缘关系较近,这表明不同地区分离株的F1L基因具有较好的保守性。