摘要：【目的】建立快速、灵敏的葡萄病毒多重RT-PCR检测体系。【方法】通过设计6对不同引物,在退火温度分别为48.0、49.0、50.0、51.0、52.0、53.0、54.0、55.0、56.0、57.0、58.0、59.0和60.0℃,采用单一RT-PCR技术检测酿酒葡萄6种常见的葡萄病毒,即葡萄病毒A(Grapevine virus A,GVA)、葡萄斑点病毒(Grapevine fleck virus,GFKV)、葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus,GFLV)、葡萄卷叶病毒1(Grapevine leafroll associated virus-1,GLRa V-1)、葡萄卷叶病毒2(Grapevine leafroll associated virus-1,GLRa V-2)和葡萄卷叶病毒4(Grapevine leafroll associated virus-4,GLRa V-4)。在此基础上,对退火温度相似、扩增片段长度不同的引物进行组合,建立能同时检测2种或2种以上病毒的多重RT-PCR检测体系。【结果】单一RT-PCR结果显示,退火温度为49℃、55℃和60℃时,可分别检测GVA和GLRa V、GLRa V和GFKV以及GFLV和GLRa V。多重RT-PCR结果显示,退火温度分别为49℃和55℃时,引物GVA和GLRa V-2以及引物GLRa V-1和GFKV组合所建立的2个多重RT-PCR检测体系可同时检测葡萄叶片中GVA和GLRa V以及GLRa V和GFKV。所检测的河西地区16份样品普遍携带葡萄病毒,部分葡萄样品同时携带两种病毒。其中,5份样品为GVA阳性,8份为GLRa V-1阳性,3份为GLRa V-2阳性,5份为GFKV阳性,所有样品均未检测到GFLV和GLRa V-4。退火温度分别为49℃和55℃时所建立的GVA和GLRa V以及GLRa V和GFKV两个多重PCR扩增体系检测结果与各样品单一PCR检测结果均一致。【结论】建立2套多重PCR检测体系,可同时有效地检测GVA和GLRa V-2或GLRa V-1和GFKV,可用于田间葡萄样品的快速检测。

摘要：以胡萝卜幼苗为材料,提取基因组DNA,根据GenBank中的已知序列设计引物,利用聚合酶链式反应技术(PCR)体外扩增获得胡萝卜抗冻蛋白基因(AFP),将其连接到pGEM-Teasy vector载体上,并对其进行生物学信息分析.结果表明:克隆的AFP基因片段全长1 206bp,其中编码区长1 026bp,共编码341个氨基酸,蛋白质分子量为38.048ku,等电点为5.43,该蛋白为亲水性分泌型蛋白,有信号肽存在;其蛋白质二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规卷曲为主.与GenBank中(A91926.1)的基因序列和氨基酸序列比较,同源性分别为99.4%和97.6%,表明AFP基因克隆成功.与不同地方品种胡萝卜AFP基因做同源性比较,结果发现不同品种间的AFP基因保持着很高的内同源性.

摘要：创新能力的培养与提升一直是本科生培养并努力的方向,目前国内多数院校在校期间的教学多以理论教育为主,动手实践能力与创新能力的培养方式单一、模式化、缺乏设计、创新性不足、特色不强、学生参与程度不高。因此,建立完善多样的培养模式是本科生创新能力教育的重要前提。以园艺专业为例,结合本科生创新教育背景和创新教育面临的问题,通过定期组织学术讲座、拓宽综合实践实习范围、对接社会团体及企事业单位、发挥学生社团作用、鼓励和支持学生参与科学研究及各类竞赛活动、发挥校园媒体力量,不断将创新精神、创新意识、创新思维、创新活力和创新灵感融入本科教育过程中,塑造和培养学生设计创造、创意形成的能力,形成独立自主的创新教育模式,达到新时代要求的复合型人才目标。

摘要：《园艺专业英语》是本科教学体系中连接专业提升和社会需求的一门工具性课程。该课程的学习效果直接与学生毕业后的考研深造和就业方向选择密切相关。结合“新农科”建设背景和社会需求下的园艺专业人才培养,以甘肃农业大学园艺学院《园艺专业英语》课程为例,从课程知识体系、生源结构、师资结构、教学方法和课程评价五方面分析了该课程的教学现状与存在问题,同时根据教学实践针对性地提出从高阶知识体系搭建、混合式课程设计、师资水平提升、多元化考核体系构建等方面进行课程改革,以期为创新农林高校《园艺专业英语》教学模式和提高该课程教学质量提供参考,同时为培养适应社会需求的国际化农林人才提供助力。

摘要：本研究旨在克隆转录因子CBF2并对其进行生物信息学分析得到该基因相关信息。试验以拟南芥基因组DNA为模板,根据GenBank中拟南芥转录因子CBF2(FJ491243.1)已知序列设计引物,回收扩增的目的片段与T-easy载体连接后转入大肠杆菌(*** DH5α),经蓝白斑筛选后提取重组体的质粒,经滞后筛选、PCR、酶切鉴定无误后进行测序。经生物信息学分析,该基因全长651 bp,其中编码区长648 bp,编码216个氨基酸,其蛋白的分子式为C1056H1623N293O333S16,相对分子质量为24.26 kDa,等电点为5.00,该蛋白为亲水性非分泌型蛋白,无信号肽存在;其蛋白质二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规卷曲为主。肽链可能含有9处丝氨酸磷酸化位点,6处苏氨酸磷酸化位点,以及2处酪氨酸磷酸化位点。本研究通过对CBF2基因的生物信息学分析,获得了该基因的相关信息,并与已有研究结果进行比对分析,推测该基因在植物抗逆过程中有重要的作用。

摘要：本试验从苹果(Malus pumila Mill)转录组数据库中挖掘SSR标记,发现其SSR标记类型共有六种,分别为:单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸,其中频率较高的重复类型为单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸。从41 890条苹果无冗余转录组序列中共搜索到了1 803条至少含有1个SSR的序列,占转录组的4.30%。高频重复类型为单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸,其中数量最多的是A/T,其次是AG/CT和GAG/CTC,共占SSRs的98.23%。该试验共设计了20对引物,分别对20份苹果材料进行PCR扩增。结果显示:20对引物均能扩增出条带,平均扩增条数为2.7。并对供试的20份苹果品种进行了聚类分析,结果与形态学及生物学分类基本一致,证明品种间亲缘关系的远近具有一定的规律,栽培品种与砧木品种的种间亲缘关系较远,而栽培种和砧木品种的种内亲缘关系较近。另外,本研究为杂交育种挑选合适的亲本,杂交育种以及培育作物新品种提供了一定的理论基础。

摘要：以皇家嘎拉苹果试管苗叶片为试材,采用正交试验设计,研究了氮形态比例(NH4+∶NO3-)、6-BA浓度、NAA浓度对叶片再生不定芽的影响.结果表明:3因素对叶片再生不定芽影响的顺序依次为:氮形态比例(NH4+∶NO3-)>NAA浓度>BA浓度,其中氮形态比例对叶片再生不定芽的影响达到显著水平.3因素水平的最佳不定芽再生组合为:氮形态比例(NH4+∶NO3-)=2∶0,6-BA 2.0 mg/L,NAA 0.1 mg/L的MS培养基.在氮形态比例(NH4+∶NO3+)=2∶0的基础上,进行6-BA、NAA小梯度筛选,结果显示,皇家嘎拉苹果试管苗叶片再生不定芽较高再生频率的培养条件为:6-BA 2.0 mg/L,NAA 0.15 mg/L的改良MS培养基.

摘要：现代农业大学园艺学科的根本目标是培养当前社会需求的园艺人才,即"懂理论、善实践、熟操作、勤分析、会解决"具有创新能力的应用型人才.而由培养方式、教学方式与课程构成组成的人才培养策略是决定学生创新能力培养成败的关键.通过在梅西大学教学法的学习,分析中西教学法的差异,结合我校近年园艺专业本科毕业生就业数据,依托精品课程、资源共享课建设的网络平台的基础,提出以课程组建设为保障,综合性设计性实验、实验室开放为支撑,加强学生讨论、展示为主的教学手段等策略,旨在为培养社会需求的现代园艺人才提供支撑.