摘要：水泥土桩是软土边坡常用的一种较经济的加固结构,但目前对水泥土桩加固边坡的变形破坏特性和抗滑机制认识不清,相应的稳定性评价理论研究较少。建立了一边坡模型,运用有限元分析了离散水泥土桩加固边坡的变形破坏特性,结果发现边坡失稳时,桩-土之间由于变形不协调而产生塑性滑移,强度和刚度都较大的水泥土桩呈S型挠曲变形而发生弯折破坏,未能有效发挥设计要求的抗滑能力,加固边坡最后形成贯通的剪切滑动带而非滑动面。提出了水泥土剪力墙的概念,通过有限元模拟发现,采用水泥土剪力墙加固边坡,因墙-土界面摩擦力的作用,下滑力在剪力墙和边坡滑体之间得到调整,最终促使加固边坡产生整体剪切破坏,有效发挥了剪力墙的抗滑能力。通过桩土复合结构的水平推剪模型试验,验证了数值模拟结果的合理性。

摘要：目的:为探索治疗乳腺癌新途径,研究RNA干扰(RNA interferance,RNAi)对MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用。方法:设计制备多对针对WT1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染MCF-7细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)法测定WT1 mRNA的表达,westernblot测定WT1蛋白的表达,流式细胞仪检测加入长春新碱后的MCF-7细胞凋亡率。结果:siRNA能有效抑制WT1基因的表达,但不呈剂量关系,在较低浓度可维持RNAi至少4d时间,WT1基因表达下调的MCF-7细胞凋亡率增加。结论:RNAi能有效抑制MCF-7细胞中WT1基因的表达,同时转染siRNA后细胞对长春新碱敏感。

摘要：从招投标电子化平台建设发展需要出发,分析了投标施工组织设计文件架构标准化,探讨了架构标准化原则2、007版《标准施工招标文件》示范文本对施工组织设计的要求,提出了对投标施工组织设计文件范式研究.

摘要：目的 应用实时定量PCR（RQ-PCR）方法 检测患者的免疫球蛋白重链（IgH）基因重排,探讨其在成人B系急性淋巴细胞白血病（ALL）患者的微量残留病（MRD）动态监测中的意义.方法 15例B系ALL患者的初诊DNA标本经PCR扩增莺排的IgH基因,克隆产物经基因测序、序列比对后,根据每例患者的克隆特异性序列信息,利用软件设计15条等位基因特异性寡核苷酸（ASO）引物,作为RQ-PCR检测的上游引物,合成通用的JH下游引物和TaqMan探针,监测患者随访标本MRD靶分子.7例Ph＋患者同时用RQ-PCR检测bcr-abl融合基因转录本.结果 使用ASO引物RQ-PCR法扩增15例患者IgH重排靶基因的敏感性为10-3～10-5,荧光背景信号未显示或较低.动态监测表明：高危组患者诱导完全缓解（CR）后体内MRD水平明显高于标危组患者,诱导CR后MRD〉10-3的患者复发率（71.4%）高于MRD≤10-3的患者（12.5%）,MRD〉10-3的患者生存时间短.另外,Ph＋患者bcr-abl融合基因转录本的对数级变化趋势与IgH重排靶基因水平的动态变化一致.结论 使用ASO引物RQ-PCR方法 检测IgH基因重排,具有敏感性高、特异性强、结果 可靠等优点,可对肿瘤克隆进行准确定量.B系ALL患者体内IgH基因重排水平与临床治疗反应和疾病预后密切相关,可用于患者病情的随访监测.

摘要：目的应用多重PCR方法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者的克隆性免疫球蛋白（Ig）和T细胞受体（TCR）基因重排，为实时定量RT—PCR（RQ—PCR）法监测ALL患者体内的微量残留病（MRD）奠定基础。方法参照BIOMED－2协作组制定的Ig和（或）TCR检测方法，设计96条不同的PCR引物，分成14个混合管，通过多重PCR，分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRB、TCRG、TCRD克隆性基因重排。结果在22例成人B系ALL患者中，Ig克隆性重排检出率为96％，其中IgH为86％，IgK为14％。在18例成人T系ALL患者中，TCR克隆性重排检出率为100％，其中TCRB为83％，TCRG为78％，TCRD为39％。两个及两个以上克隆性标志物的检出率在B和T系ALL中分别为91％（22例中20例）和89％（18例中16例）。结论BIOMED－2协作组设计的14管多重PCR引物和方法，几乎可检测到淋巴细胞白血病患者体内所有占优势的克隆性T、B细胞增殖群体，方法简便、可靠、覆盖面广，适用于成人ALL患者基凶重排检测和MRD监测。

摘要：目的建立实时定量RT-PCR（RQ—RT—PCR）方法，检测初诊白血病患者骨髓细胞中的常见特征性分子生物学标志物的表达水平，评价其在疾病诊断和微量残留病（MRD）监测中的意义。方法设计TaqMan探针和引物，建立RQ-RT-PCR法对常见融合基因转录本（bcr-abl、AML-ETO、PML-RARer）和abl阳性模板进行扩增，检测202例初诊白血病患者的融合基因转录本含量。结果初诊白血病患者中的融合基因表达水平以绝对量表示，bcr—abl转录本b3a2或b2a2型拷贝数为47614．63，bcr-abl转录本ela2型拷贝数为98847．53，AML1-ETO转录本拷贝数为300029．51，PML-RARα转录本拷贝数为25506．28。以abl校正拷贝数（NCN）表示相对量，bcr-abl转录本b3a2或b2a2型为1．05、bcr-abl转录本ela2型为0．91、AML1-ETO转录本为5．33、PML-RARα转录本为0．55。结论以abl校正拷贝数计算融合基因表达水平，结果更准确、直观，优于绝对定量。同时，不同类型融合基因转录本在初诊白血病患者中表达水平不同。

摘要：目的构建人组织型基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)编码序列基因逆转录病毒表达载体,转染人单核细胞白血病细胞株,为探讨TIMP-2的生物学功能奠定基础。方法根据基因库中已公布的序列设计引物,用PCR方法扩增出人TIMP-2编码序列基因片段,用限制性内切酶及T4连接酶将目的片段插入MSCV逆转录病毒载体中。采用酶切和PCR鉴定及测序后经脂质体介导转染至PT67包装细胞中,以病毒上清感染单核细胞白血病细胞株SHI-1,G418筛选,极限稀释法挑选单克隆细胞株,定量PCR和Western Blotting检测TIMP-2的表达。结果TIMP-2基因克隆进逆转录病毒载体MSCV中,经酶切、PCR和DNA测序证实重组逆转录病毒载体构建正确,病毒上清感染SHI-1细胞,经G418筛选并挑选出单克隆细胞,经实时定量PCR和Western Blotting检测发现SHI-1细胞中TIMP-2 mRNA及蛋白表达明显上调。结论成功构建了高表达TIMP-2的SHI-1细胞,可对其生物学行为作进一步研究。

摘要：目的　建立实时定量PCR(RQ PCR)检测慢性髓系白血病(CML)bcr/ablP210融合基因转录本,评价其在CML诊断和微小残留病(MRD)监测中的意义。方法　设计TaqMan探针和引物,建立RQ PCR法对b3a2和ABL阳性模板进行扩增,并检测22例CML患者bcr/ablP210转录本含量。结果　RQ PCR法最低可检测到 10个拷贝 /μl的阳性模板,但重复性较差,而 108 ~102 拷贝 /μl的重复性良好,正常对照无扩增信号。19例初诊CML患者bcr/ablP210转录本绝对含量为 1. 42×102 ~2. 24×105拷贝 /50ng(中位数量 3. 06×104 拷贝 /50ng),ABL纠正后的相对含量为 3% ~687% (中位数 147% )。2例患者骨髓移植后bcr/ablP210转录本下降, 1例患者由慢性期进展为加速期时含量显著增高。结论　RQ PCR方法敏感、可靠,可用于CML患者的诊断和MRD随访监测。

摘要：当前国内普通高校机械类、机电类、自动化类各专业普遍开设《工程测试技术》《数字信号处理》等课程,其中数字信号采集与处理是教学的重点与难点;由于扩招,存在实验设备不足问题,导致教学效果不佳。文章基于虚拟仪器技术,设计了能应用于课程实验教学的虚拟仿真实验系统。通过在广东技术师范大学机电类、机械类专业《工程测试技术》等课程的教学实践,使用虚拟仿真实验成本低,实验操作步骤简单,人机交互友好,实验结果具有可视化效果,能加深学生对抽象概念的理解,简化繁杂的数据计算过程,学习效果显著。

摘要：目的 建立实时定量逆转录PCR（RQ-RT-PCR）检测各种急慢性白血病的特征性分子生物学标志物,评价其在疾病诊断和微小残留病（MRD）监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-RT-PCR法对各种融合基因转录本和ABL阳性模板进行扩增,并检测177份白血病标本的转录本含量,同时做细胞遗传学检查.结果 RQ-RT-PCR法最低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但重复性较差,而（10^8～10^2）拷贝/μl的重复性良好,正常对照无扩增信号.与细胞遗传学相比,RQRT-PCR的敏感性和特异性更强,对白血病标志物的阳性检出率更高.对12例不同类型白血病患者的MRD随访监测表明：患者体内融合基因转录本的含量随病情进展逐渐升高,随病情好转逐渐下降,并且早于细胞遗传学预测疾病复发.结论 RQ-RT-PCR方法更敏感、可靠,与疾病的关系更密切,可用于白血病的诊断和MRD随访.