摘要：本文以语文练习为例,提出了创新练习设计的主要内容和具体方法。

摘要：21世纪是知识经济的新世纪,新时代召唤着创新型的人才,创新型的人才呼唤着创造思维能力的培养与训练,创造思维能力只有在创造性实践活动中才能培养,创造性的实践活动呼唤着创新练习的设计。练习,既是识记、理解、分析、综合、评价、运用所学知识解决问题的过程,又是练习思维活动的外显。解题的思路,决定于解题的思维方法和有新的独特的见解。信息高度发达的知识经济时代客观要求我们设计的练习必须具备开发智力的价值,有利于学生灵活运用已有的知识和创见去发现问题、分析问题,并解决问题。创造思维是所有思维力中最活跃最可贵的因素。外显性特别强的语文练习为培养学生的创造思维能力提供了广阔的用武之地。语文教师在设计练习时除着眼于双基训练外,应该自觉、主动。

摘要：练习既是识记、理解、分析、运用所学知识解决问题的过程,又是练习思维活动的外显。解题的思路,决定于解题的思维方法和有新的独特的见解。信息高度发达的知识经济时代,客观要求我们设计的练习必须具备开发智力的价值,有利于学生灵活运用已有的知识和创见去发现问题、分析问题,并解决问题。创造思维是所有思维力中最活跃最可贵的因素。外显性特别强的语文练习为培养学生的创造思维能力提供了广阔的用武之地。语文教师在设计练习时除着眼于双基训练外,还应该自觉、主动、精心设计新颖的独创的能激发学生创造思维兴趣的练习,以有意识、有计划、按步骤地强化学生创造思维能力的训练,下面试谈十一种:

摘要：目的:建立一种多重实时荧光PCR同时检测EPEC、EIEC、EHEC三种致泻性大肠埃希菌和志贺菌的方法。方法:于GenBank数据库中查找三种致泻性大肠埃希菌及志贺菌毒力基因stx1、stx2、eaeA及ipaH基因序列并使用软件进行比对后设计四套引物及探针,建立四重实时荧光PCR检测EPEC、EIEC、EHEC和志贺菌的方法,并对方法反应体系及反应条件进行优化,对方法的特异性、敏感性及重复性进行分析。结果:显示该方法具有检测灵敏度高、特异性强,结果与细菌培养结果完全一致,均为100%。结论:四重实时荧光PCR检测体系可同时检测EPEC、EIEC、EHEC和志贺菌,具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可广泛应用于临床检验、卫生检验、食品检验等领域,对快速有效的实施针对治疗,预防食物中毒,保障公众健康具有重大意义。

摘要：目的:建立一种快速、准确、灵敏的检测肠产毒大肠埃希菌肠毒素基因方法。方法:于GenBank中查找ETEC肠毒素基因lt和st序列并进行比对后设计引物及TaqMan-MGB探针。对引物、探针、Mg2+、TaqDNA聚合酶及dNTPs浓度进行优化,并对方法的灵敏度、特异性、重复性进行分析。结果:建立了双重实时荧光PCR法检测ETEC肠毒素基因lt和st方法。结论:建立了一种灵敏、特异的检测ETEC肠毒素基因的方法。该法在疾病控制相关和临床实验室中具有广泛的实际应用价值。

摘要：目的建立同时检测鼻病毒(HRV)、人呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(HMPV)的三重实时定量RT-PCR技术,为快速诊断呼吸道感染病原体提供支持。方法以HRV的5'UTR、RSV和HMPV的L区为检测靶基因,设计三对引物和相应TaqMam探针,建立三重实时定量RT-PCR检测HRV、RSV、HMPV的方法,评价方法的特异性、灵敏性和重复性,比较其与单重荧光RT-PCR在临床快速诊断应用的差异。结果该方法对HRV、RSV、HMPV的检测下限为10 copies/μl,特异性实验未出现非特异性扩增,重复试验Ct平均值变异系数均<5%,与单重检测方法比较,三重RTPCR检测方法成本低,实验耗时短,2种方法的临床标本阳性检出率无统计学意义。结论三重实时荧光RT-PCR反应体系可同时检测HRV、RSV、HMPV,具有快速、特异性强、灵敏度高等特点。

摘要：目的建立一种检测肠出血型大肠埃希菌(EHEC)产毒基因stx1和stx2的TaqMan双重实时荧光PCR法。方法根据GenBank公布的EHECstx1和stx2基因序列进行比对后设计相应的PCR引物和TaqMan探针,探针报告基团分别使用FAM和HEX标记,淬灭基团使用BHQ1标记。建立双重实时荧光PCR反应体系并对反应条件进行优化,对方法的灵敏度、特异性及其重复性进行分析。结果建立了EHEC双重实时荧光PCR检测方法。菌液浓度为102～108cuf/ml时,均可观察到扩增曲线,且扩增曲线平滑;检测30份模拟临床样品,均检测到stx1和stx2基因,且均培养出EHEC,该方法灵敏度为100%;3次重复测定108、105、102cfu/ml3个高、中、低浓度的菌液DNA模板,得到其扩增曲线,计算各浓度的Ct值标准差及变异系数,均小于5%,在误差允许范围内。结论建立的双重实时荧光PCR法可快速、灵敏、特异、有效地检出EHEC。

摘要：目的建立双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法。方法在Gen Bank数据库查找序列并比对后设计tdh和vvh A基因引物和探针。对PCR反应退火温度、引物、探针、Mg2+、Taq DNA聚合酶及d NTPs浓度进行优化,确定反应体系和反应条件,并对新建方法的特异性、灵敏度等方面进行分析,对模拟样品进行检测。结果建立了双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法。该方法的特异性较好,检测限为103 CFU/ml。结论建立的双重荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地检测副溶血性弧菌和创伤弧菌。

摘要：目的建立一种快速、特异检测Nam Dinh病毒（NDi V）的实时荧光PCR方法。方法根据Gen Bank和本实验室分离的NDi V进行序列比对,找出保守序列（Rd Rp）并设计特异引物和Taq Man-MGB探针,通过调整引物、探针浓度,优化其反应条件,对方法做灵敏度、特异性、稳定性实验,以评价反应体系。结果 NDi V的Taq Man-MGB实时荧光PCR检测方法用时短,灵敏度高,最低检测下限为0.1 PFU。与登革热1-4血清型病毒、流行性乙型脑炎、人呼吸道合胞病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒无交叉反应,特异性良好;将4份核酸含量不同的标准样品重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为1.67%-3.68%,稳定性较高。通过监测,龙岗区蚊虫携带NDi V概率为18.00%。结论NDi V的Taq Man-MGB实时荧光PCR方法是一种快速、特异、灵敏、稳定性好的方法,可应用于流行病学环境监测,提高病毒的快速检测能力。