摘要：利用ChBD和SUMO标签构建4种不同的融合蛋白体系,分别为ChBD-Hep I、ChBD-SUMO-Hep I、SUMO-ChBD-Hep I和ChBD-Hep I-SUMO。经过发酵工艺优化实验,确定该4种酶在最优条件下的摇瓶发酵酶活分别为2.44IU/mL、6.92IU/mL、6.01IU/mL和4.51IU/mL。同时,通过酶学性质研究,确定该4种重组酶的最适反应温度与pH分别为30℃和7.0,表明SUMO和ChBD标签不影响Hep I的催化反应。4种重组酶的热稳定性较天然Hep I明显提高,其中ChBD-SUMO-Hep I在30℃半衰期达50min,由此,确定其为最优菌株。将ChBD-SUMO-Hep I进行5L发酵罐扩大培养,酶活达到26IU/mL,是摇瓶培养的5倍,表明其具有工业化生产的潜质。

摘要：以含半乳糖的甲基丙烯酸羟乙酯和对苯乙烯磺酸钠为单体,通过可逆加成断裂链转移聚合设计合成了一系列具有不同结构的含糖高分子.采用核磁共振氢谱和凝胶渗透色谱对材料的结构进行了表征.分别通过比浊法和酶联免疫吸附实验,以花生凝集素(PNA)为模型,研究了磺酸基的数量及分布对材料与凝集素之间相互作用的影响.结果表明,磺酸基的引入能通过静电相互作用协同增强含半乳糖高分子与PNA之间的特异性结合作用,并且这一作用可通过磺酸基数量与排列方式进行调节,相对于嵌段共聚型材料,无规共聚型材料与PNA的结合作用更强,其中P(Gal21-r-SS41)与PNA的结合作用最强,较均聚半乳糖高分子(PGal)提高2.7倍.利用这种相互作用,材料能够通过阻断凝集素活性有效抑制肿瘤细胞的迁移,有望在临床抗肿瘤转移治疗中得以应用.

摘要：为了解决传统抗肿瘤药物阿霉素水溶性不佳,对机体选择性差的情况,设计了一种还原敏感的K5胶束药物载体。将脱氧胆酸(DOCA)通过双硫键与K5多糖连接,制备两亲性K5PSSS-DOCA(KSD)缀合物。该缀合物在水溶液中可自组装形成胶束并包载模型药物阿霉素(DOX)。胶束形貌通过透射电镜进行观测,并进一步通过动态光散射测定其水合粒径及ζ-电位。胶束为球形,其水合粒径和ζ电位在载药前分别为225nm与-31mV,载药后为241nm与-31mV,具有较好的稳定性。该胶束在谷胱甘肽(GSH)存在条件下,可表现出明显的还原响应药物释放行为。细胞实验结果证实,载体材料有良好的生物相容性,含药胶束对肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)低于正常细胞,对肿瘤细胞有明显选择性。

摘要：目的利用大肠杆菌表达P-选择素靶向肽(P-selectin banding peptide,PBP)与载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,ApoA1)的融合蛋白PBP-ApoA1,将其制备获得包载姜黄素(curcumin,Cur)的重组高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)PA-rHDL-Cur,用于动脉粥样硬化部位的靶向递药。方法采用谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)标签共表达的策略实现PBP-ApoA1的可溶性表达,将PBP-ApoA1纯化后与磷脂、胆固醇采用薄膜水化法包载姜黄素制备得到PA-rHDL-Cur载药纳米粒。利用粒度仪、紫外分光光度计表征其理化性质,透析法分析其释药稳定性。体外细胞实验考察PA-rHDL-Cur的生物相容性和细胞摄取效率,通过血小板黏附实验验证PA-rHDL对活化血小板的靶向性。探究PA-rHDL-Cur对RAW264.7巨噬细胞的抗氧化功能、胆固醇泵出效果和减少氧化型高密度脂蛋白的摄取能力。结果通过摇瓶发酵和纯化PBP-ApoA1产量达1.33 g·L^(-1),PA-rHDL-Cur大小均一,粒径为(165.3±29.6)nm,Zeta电位(-2.19±1.28)mV,生物相容性较好。体外实验证实,PA-rHDL-Cur可靶向到动脉粥样硬化病灶部位,释放Cur降低病灶部位泡沫细胞内的氧化应激,显著提高Cur的生物利用度。PA-rHDL本身含有的ApoA1可通过胆固醇逆向转运促进胆固醇外排,进而延缓动脉粥样硬化的发展进程。结论本研究设计的仿生重组高密度脂蛋白纳米递药系统为开发抗动脉粥样硬化的新型纳米递送体系提供了设计思路与理论依据。

摘要：背景:大分子修饰的金纳米粒子可被应用于治疗学或诊断学等其他方面,但是大多数报道多限于制备蛋白质、DNA及小分子糖修饰的金纳米粒子方面,对于制备多糖修饰的金纳米粒子的研究尚不深入。目的:制备一种肝素修饰的金纳米粒子,考察工艺条件并对其粒径及紫外吸收光谱进行观察。设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-04/2008-09在武汉理工大学化工学院生物技术制药实验室完成。材料:制备金纳米粒子并在4℃保存供实验用。方法:将肝素钠用亚硝酸降解法降解,得到还原末端为醛基的肝素,分别溶解于二甲亚砜、含0.05mL,0.5mL冰醋酸的二甲亚砜溶液,再与对巯基苯胺发生还原胺化反应,用氰基硼氢化钠作还原剂,得到带巯基的肝素衍生物。另取样品溶解于4支含0.5mL冰醋酸的二甲亚砜溶液的瓶内,再加入对巯基苯胺和氰基硼氢化钠,分别反应2,4,6,24h。将得到的肝素衍生物加入到制备好的金纳米粒子溶液中,肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面。主要观察指标:①肝素修饰前后金纳米粒子的紫外光谱最大吸收波长。②肝素修饰前后金纳米粒子的粒径大小。结果:制备金纳米粒子时,当柠檬酸钠和氯金酸物质的量比为6∶1时,纳米粒子粒径均一。通过还原胺化反应制备端基为巯基的肝素时,加入冰醋酸的量越多,反应产率越高。反应6h内,反应时间越长,其反应产率越高,24h的反应产率虽比6h的略有提高,但差别不大,说明6h反应已经基本完全。将肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面,金纳米粒子的粒径为10nm,紫外最大吸收为522nm;肝素修饰的金纳米粒子的粒径为20nm,紫外最大吸收为529nm。结论:制备了粒径均一的肝素修饰的金纳米粒子,并且粒径大小对纳米粒子的紫外最大吸收有影响。还原胺化反应的最佳反应条件是采用浓度比为8∶1的二甲亚砜/冰醋酸混合溶液作为溶剂,反应时间为6h。

摘要：本科毕业论文设计是大学生独立从事科学研究的初步尝试,是检验学生掌握知识的程度、分析问题和解决问题基本能力的一份综合答卷,也是一次全面的创新性实践学习.本文以指导一名药学专业的学生完成本科毕业论文的全过程(包括选题、实验方案设计、实验、数据处理分析与结果表述)为例,介绍如何将丰富的网络资源有机融入到毕业论文设计的各个环节,从而提高本科毕业论文的质量,培养学生独立思考、发现问题和解决问题的能力.

摘要：科学思维是物理学科核心素养的内核。深度发展学生的科学思维,突出物理概念、规律、理论形成过程中的科学思维,是物理学科教学从知识转向核心素养的突出表现。文章以“匀变速直线运动”的教学片断为例,诠释了发展学生科学思维的教学策略,使得学生不仅能理解物理知识,而且还训练了科学思维,从而提升学生的物理学科核心素养。

摘要：传统的D型多级泵的轴向力平衡采用平衡盘/平衡环机构进行平衡,但是井下大型多级泵的平衡盘/平衡环更换麻烦,维修工作量大,如果有一种结构能够降低平衡盘/平衡环的更换频率甚至不用更换,即使增加制造成本同时牺牲部分水力性能也是有益可取的。文中通过定性分析探讨了一种无平衡盘/平衡环结构的多级泵。

摘要：背景:传统的胶原蛋白海绵支架降解速度过快,机械强度低,在应用过程中容易塌陷,很难维持其固有形态,不能满足长期执行细胞支架功能的需要,常见的交联方式又存在细胞毒性或胶原蛋白变性等缺陷。目的:设计一种新的交联工艺,并对工艺条件进行优化,制备出力学性能和耐降解性能良好的胶原蛋白海绵支架材料。方法:通过体外自组装技术对胶原蛋白进行改性处理,制备具有丝状结构的胶原蛋白纤维,采用单因素分析考察初始胶原蛋白质量浓度、磷酸盐终浓度及p H值对胶原蛋白自组装转化率的影响;根据单因素实验结果,采用正交实验得到最佳胶原蛋白自组装工艺条件。将最佳工艺条件制备的胶原蛋白溶液与未进行改性处理的胶原蛋白溶液冷冻干燥得到胶原蛋白海绵,并进行表征。结果与结论:胶原蛋白体外自组装的最佳工艺为:初始胶原蛋白质量浓度为2 g/L,p H=8,磷酸盐终浓度为15 mmol/L,此时自组装转化率最大。扫描电镜显示改性处理胶原蛋白海绵具有纤维丝构成的网状结构,其溶胀率、保水率、机械强度均高于未改性处理胶原蛋白海绵(P<0.05),克服了未改性处理胶原蛋白海绵降解过快的缺陷。

摘要：物理学科的核心素养包括物理观念,科学思维,科学探究,科学态度与责任,如何在物理课堂教学中落实发展学生的核心素养,笔者认为,就物理学科的特点而言,基于情景发现问题,以问题为导向展开探究,通过问题引领、任务驱动,让学生在探究中发展科学思维,提升科学探究能力,在探究中提炼物理概念和规律,促进物理观念的形成,在探究实践中形成科学态度,树立科学责任,是物理教学发展学生核心素养的基本路径,要使这一教学过程发挥最大化效益,问题的提出要情境化,问题的探究要深度化.