摘要：目的:构建肾癌缺氧诱导因子2(HIF-2)小干扰RNA真核表达载体,并研究其对肾癌786-0细胞中HIF-2蛋白表达的影响。方法:根据GenBank数据库提供的HIF-2基因核苷酸序列,选择设计双链小干扰RNA,合成HIF-2RNAi片段No1、No2、No3和对照片段,将RNAi片段定向克隆于pSilencer2.1-U6neo真核表达载体,转化感受态菌,挑取阳性载体克隆,DNA测序进行鉴定;培养人肾癌786-0细胞,在脂质体的介导下分别将No1、No2、No3和对照片段重组载体转染入人肾癌786-0细胞,并设未转染组,WesternBlot法检测各载体对肾癌786-0细胞中HIF-2蛋白表达的影响。结果:构建的HIF-2RNAi真核表达载体经DNA测序证实与设计完全一致,转染肾癌786-0细胞24h后,No1组、No2组和No3组HIF-2蛋白表达水平降低(分别为0.05±0.00、0.11±0.01、0.15±0.01),与未转染组(0.22±0.02)和对照组(0.21±0.01)相比,差异有统计学意义(F=83.85,P0.05)。结论:成功构建人肾癌HIF-2RNAi真核细胞表达载体,并可有效干扰肾癌786-0细胞中HIF-2蛋白的表达。

摘要：党的十五大是承前启后、继往开来,把建设有中国特色社会主义的伟大事业全面推向21世纪的历史性盛会。大会期间,本刊编辑部派记者约请部分十五大代表撰文谈自己参加十五大的感受和学习十五大报告的体会。现将他们的心得体会摘登如下。