摘要：目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,***)致细胞空泡毒素抗原(Vacuolating cytotoxin antigen A,vacA)毒性片段与霍乱毒素(Cholerae toxin,Ctx)B亚单位(ctxB)基因的原核表达载体,为进一步表达VCTB重组蛋白,制备防治***感染的口服疫苗奠定基础。方法:通过比较国内***代表株的vacA基因毒性亚单位,找出高度同源性片段,按基因文库中提供的vacA基因和ctxB基因序列设计引物。以***基因组DNA为模板,PCR扩增vacA毒性片段基因,克隆至质粒pQE30中,获得重组质粒pQE30-vacA。以pET32(α)+-ctxB质粒为模板PCR扩增ctxB目的基因。再将纯化的ctxB基因片段插入pQE30-vacA中,构建含双基因的表达质粒pQE-vctB,构建的表达质粒pQE-vctB转化大肠杆菌Top10,培养后,提取纯化重组质粒pQE-vctB,内切酶双酶切鉴定。结果:扩增的vacA DNA片段约为723bp,ctxB基因的DNA片段约为372bp,与预计长度相符合。构建的表达质粒pQE-vctB酶切鉴定,与插入pQE30的目的基因片段相符。测序结果vctB融合基因由1092bp组成,编码364个氨基酸残基的多肽,与基因文库相符。结论:含vacA和ctxB融合基因的原核表达载体构建成功,为进一步表达VCTB重组蛋白奠定了基础。

摘要：目的查找9种细菌和1种真菌的水通道蛋白基因,为进一步探讨细菌水通道蛋白的生理功能奠定基础。方法根据细菌水通道蛋白的保守氨基酸序列,设计合成简并核苷酸引物。提取目标菌DNA,简并PCR扩增细菌水通道蛋白基因。扩增产物回收纯化,DNA测序,推导其氨基酸序列并BLAST分析。结果10种目标菌中,大肠埃希菌和痢疾志贺菌扩增出所需的DNA片段。电泳分析其分子质量约为400 bp和370 bp,其序列与细菌水通道蛋白-甘油易化蛋白基因高度同源,相似性分别为97%和94%;推导氨基酸序列与细菌水通道蛋白氨基酸高度同源,相似性为83%和87%。结论利用简并PCR在大肠埃希菌中扩增出甘油易化蛋白基因,并发现痢疾志贺菌中存在甘油易化蛋白基因。

摘要：近年来建筑信息模型(BIM)由于其可视化、模拟性、优化性等特点,广泛运用于建筑行业。土建类高职院校培养毕业生作为现场主要的施工技术管理人员有必要掌握BIM技术以面对今后实际工程项目。针对当前发展形势,以"建筑施工组织管理"课程为研究对象,通过施工现场布置案例,说明课程中融入BIM技术的必要性和紧迫性。

摘要：当前BIM技术在建筑工程中广泛应用,为与行业接轨,融入BIM技术的CAD课程教学新思路显得尤为重要。针对当前发展形势,对BIM融入CAD教学的必要性进行了简要概述,分析了BIM技术在CAD制图教学中的实践应用,对BIM技术融入CAD制图课程教学的具体实施措施进行了探讨。为建筑CAD课程的教学改革提出了一些参考建议。

摘要：近年来BIM技术在我国建筑行业运用广泛,各企业所采用BIM软件不尽相同,使得建筑设计阶段不同软件基于BIM的工程量信息存在一定差别且信息不能通用,导致与后期施工模型工程量信息对接和传递存在一定误差。通过工程实例,以广联达土建算量软件计算结果为标准,对比了不同建模软件工程量信息,分析了误差原因并提出了BIM设计阶段建模建议。