摘要：目的对屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)8类变应原Der p 8进行克隆表达、纯化及免疫原性分析,并用生物信息学方法分析其同源性。方法根据已知Der p 8基因序列,设计PCR引物;提取屋尘螨总RNA,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增得到Der p 8的cDNA片段,以cDNA和设计的引物进行PCR扩增;扩增产物连接至T载体并转化入大肠埃希菌(*** Top10)中,培养后挑选阳性单克隆菌落测序。测序正确后,转入表达载体pET-32a,经酶切鉴定、测序后转入表达菌BL21,大量表达重组蛋白Der p 8。用亲和层析法纯化后进行免疫印迹分析(Western blotting)。利用生物信息学方法分析Der p 8基因的同源性。结果酶切鉴定显示Der p 8表达载体构建成功,目的基因分子量约为700 bp;SDS-PAGE电泳显示Der p8重组蛋白成功表达,分子量约为38 kD,且主要以包涵体形式存在。Western blotting结果显示Der p 8重组蛋白具有免疫原性。同源性分析结果显示本实验克隆Der p 8基因与NCBI基因库的Der p 8基因同源性为76.97%。结论本实验成功克隆表达并纯化出具有免疫原性的Der p 8重组蛋白,为临床上应用重组蛋白于诊断和治疗提供理论基础。

摘要：为了提高我厂磨木浆的质量,提高新闻纸的白度及改善它的一些物理性能,以便适应胶印新闻纸的需要,加强产品竞争能力。 1990年,我厂向奥地利安德里茨(AN-DRIZ;下简称A)公司,引进一套日产150吨风干浆双氧水高浓漂白生产线。除了双网压滤机至高浓混合器,及漂塔底部的卸料系统的主要设备,以及这些设备的配套自动控制仪表之外,其余设备均是我厂自行非标设计和国内选型配套。1991年下半年开始安装,1992年3～4月中旬成功地完成全线投料试机投产,至今设备运行正常,各项指标均达到生产要求。

摘要：前 言 我厂化浆车间原有三台容积各为100m^3蒸煮锅(铆接结构),采用亚硫酸钙法生产马尾松化浆,供生产新闻纸用。三台锅合计平均日产细浆量90吨左右。 近年来,由于木材资源紧缺、造纸厂饥不择食,购进的纸材质量普遍下降。加上林业部门发展综合利用,割脂材大量增加,致使蒸煮工艺难于控制,造成粗渣生片多、细浆得率及物理强度下降,新闻纸中化浆配比上升。另外,每月得有一个锅要停煮两天检修,每隔3.3年要有一个锅停产大修50天,平均每年减产化浆约450吨,相当于每年减产新闻纸约1500吨。

摘要：为了改善机械磨木浆的白度及它的一些物理性能,使其适应生产胶印新闻纸的需要,我厂于1990年从奥地利ANDRIZ公司引进了一套日产150吨磨木浆H_2O_2高浓漂白生产线。其中包括双网压滤机、高浓混合器,以及漂塔底部的卸料系统中的主要设备,还有配套的自动控制仪表等,其余设备均由我厂自己非标设计和国内选型配套。1991年下半年开始安装,1992年4月中旬完成全线投产,至今设备运行正常,各项指标均达到生产要求。

摘要：粉尘螨是诱导过敏性疾病的重要变应原,可诱发Ⅰ型变态反应,对其免疫原性的鉴定是研究过敏性鼻炎等过敏性疾病的基础.首次对粉尘螨过敏原基因Der f 35进行克隆表达、纯化及免疫原性鉴定,提取粉尘螨总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA),根据已知基因序列(GenBank:LC175222.1)设计引物进行反转录聚合酶链式反应扩增,经Bam H I和Xho I双酶切,连接构建pET-32a-Der f 35载体,并克隆至大肠杆菌TOP 10菌株,取1 mL克隆菌液进行测序.使用试剂盒提取高纯度质粒转至感受态细胞Rosetta(DE3)中进行诱导、表达纯化及免疫学鉴定,并进行同源性比对分析、进化树构建及二级结构预测.克隆和表达结果显示,Der f 35基因的片段长约436个碱基对(base pair,bp);重组蛋白Der f 35相对分子质量约为30 ku(1 u=1 D),与预期结果相符.蛋白质印迹法结果证明,Der f 35与尘螨过敏性疾病患者的血清结合有明显的反应原性.生物信息学进化树结果显示,粉尘螨与屋尘螨、热带无爪螨、害嗜鳞螨、绵羊痒螨和免耳痒螨亲缘关系较近,二级结构预测显示Der f 35的氨基酸序列由2个α螺旋、6个β折叠、2个β转角和10个无规则卷曲片段组成.研究结果可为尘螨过敏性疾病的诊断与治疗提供理论依据.

摘要：本文笔者根据多年的工作经验,提出提高伐区调查设计精度的主要问题与技术措施。

摘要：本文通过对"世行货款三期项目"中采用的社区林业评估方法介绍,简述了社区林业评估在该项目造林设计中的应用,并对评估结果和体会作了总结。

摘要：从深圳地区采集粉尘螨纯培养,提取总RNA,根据香港中文大学合成的尘螨基因序列并设计的引物,RT-PCR扩增出Der f4基因,克隆到pUC57载体后测序和进行生物信息学分析.将该目的基因克隆到pET-28a表达载体上得到重组质粒pET-28a-Der f4.用生物软件分析尘螨变应原Der f4序列.RT-PCR获得目的基因Der f4 cDNA全长为1 593 bp.推测编码蛋白由526个氨基酸组成,生物信息学分析表明,Der f4具有多种磷酸化位点,含有信号肽,为疏水性蛋白,包含淀粉酶抑制剂功能结构域.获得Der f4基因全长,其编码的细胞外疏水性蛋白可能具有淀粉酶抑制剂活性.

摘要：通过NCBI查找到罗氏沼虾原肌球蛋白的mRNA,根据其CDS区域设计特异引物,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体pET-28a上,转化到***21(DE3)和*** Rosatta后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化.采用免疫印迹检测其与对虾过敏患者血清的IgE结合活性.对罗氏沼虾变应原进行了表达、鉴定及纯化,成功地获得了具有变应原活性的重组罗氏沼虾原肌球蛋白,为罗氏沼虾过敏性疾病的诊断、治疗奠定了基础.