摘要：利用CRISPR/Cas9和ES细胞技术,在小鼠ES细胞株上敲除小鼠H2-K1基因,为研发MHCⅠ类基因人源化小鼠打下基础。设计了两个单向导RNA(single guide RNA,sgRNA),分别靶向H2-K1基因的外显子2和外显子3。以p X330质粒为骨架构建表达sgRNA的打靶载体。用电穿孔转染法将构建好的质粒以及p SUPER-puro共同导入小鼠ES细胞中,实现基因敲除。在嘌呤霉素筛选后,利用PCR初步检测靶基因的敲除情况,再通过测序以及流式细胞分析确定敲除H2-K1基因的小鼠ES细胞。结果显示:利用CRISPR/Cas9技术,小鼠ES细胞的H2-K1基因被成功敲除,通过PCR检测到4个克隆为H2-K1单等位基因敲除(19.0%),2个克隆为H2-K1双等位基因敲除(9.5%)。经过测序以及流式细胞分析,2株小鼠ES细胞被确认为H2-K1双等位基因敲除。本研究利用CRISPR/Cas9技术得到H2-K1基因敲除的小鼠ES细胞株,为MHCⅠ类基因的敲除和置换提供了参考。

摘要：本文以舞蹈身体语言和舞蹈创作理论为支点,运用舞蹈身体语言学的研究方法如拆解、整合等,对敦煌舞蹈进行简略阐述与分析。其初衷是强调坚持传统舞蹈编创的创作依据与研究方法;运用舞蹈编创理论,将理论学习与艺术实践相结合,进一步验证舞蹈身体语言和舞蹈创作理论在传统舞蹈编排过程中的重要作用,从而更好地对中国传统而古老的敦煌舞蹈艺术进行身体力行的研究与创作。

摘要：为保证输送系统流量供应的稳定性和准确度,设计了一种新型可调汽蚀文氏管并提供了设计思路,其具有设计简单、线性度好、流量调节范围广等优点。通过理论分析,对该新型可调文氏管的流量计算公式进行了推导,获得流量与行程的关系式。最终选用较小的针锥全角、较大的喉部直径、截断针锥等操作,有效地提高了可调文氏管的线性度。对该可调文氏管进行了水试试验,通过不断调整针锥行程,获取了流量与针锥行程的对应关系。试验结果表明,本文设计的可调文氏管满足10:1的流量调节比要求,同时在超大流量调节比下依旧能够保证较好的线性度,可以作为流量调节器。

摘要：在对常规船舶，特别是超规范船舶，进行结构的直接设计时，首先要对波浪弯矩设计值作出估计。要确切地做到这一点，必须在明确船舶使命的前提下，设计人员要学会合理地选择好在船舶执行海域的海浪长期统计资料，然后根据船舶的装载工况，实际可能达到的航速，借用线性切片理论或非线性理论进行波浪弯矩的长期预报来确定设计值。本文就一艘大型集装箱船舶，按五个典型海域的海浪统计资料，对波浪弯矩及波浪合成弯矩作了长期预报计算，并与IACS的统一纵强度要求UR－S11的结果作比较和分析，给出了对船舶结构直接设计有指导意义的几点结论。

摘要：[目的]分析青藏高速公路水环境敏感路段危险物品运输环境风险,制定相应的预防和应急对策。[方法]在识别青藏高速公路沿线水环境敏感路段基础上,运用概率估算法预测危险物品运输环境风险。[结果]青藏高速公路水环境敏感路段长477.48km,占路线全长的42.77%,其中强敏感区路段89.52km,中敏感区路段221.49km,弱敏感区路段166.47km;青藏高速公路在预测年内危险物品运输车辆的交通事故概率较小,其平均发生概率为0.1625~1.1760次/a,危险物品运输事故环境污染风险在不同敏感路段排序为:中敏感区路段>强敏感区路段>一般路段>弱敏感区路段;通过完善公路污染防治与应急措施以及对危险物品运输车辆的管理与监控,能有效地降低危险物品运输事故造成的环境污染风险。[结论]青藏高速公路水环境敏感路段占研究路段比重大,在危险物品交通运输过程中采取污染防止措施和应急措施可以有效降低青藏高速公路危险物品运输环境风险。

摘要：湘居设计单位立(个人)名称长沙市规划设计院有限责任公司设计说明项目简介项目以湖南传统民居为设计原型,为改善湖南大部分乡村落后的居住条件,设计打造了具有一定推广性的新农居住宅,提高村庄规划建设水平,切实改善农村人居环境,助力乡村旅游发展。