摘要：目的该研究利用多重基因表达分析系统(GeXP)检测平台,建立禽流感病毒(AIV-H5、AIV-H7、AIV-H9)、登革病毒,基孔肯亚病毒的检测技术方法。方法制备病毒标准品质粒,收集病原体样本,利用GenBank下载病毒的核苷酸序列,根据病毒的序列特征,利用GeXPeXpress Profiler设计特异性引物,优化条件使GeXP系统能够特异性的检测对应病毒。结果优化后的引物能够同时检测禽流感病毒(AIV-H5、AIV-H7、AIV-H9)、登革病毒和基孔肯亚病毒病毒,特异性强,无交叉反应。结论GeXP检测方法的建立为快速检测禽流感病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒提供了便利,对分子诊断有重要意义。

摘要：目的 利用GeXP系统结合多重PCR技术，建立诺如病毒（GI和GII组）、轮状病毒、星状病毒的方法。方法根据4种病毒的序列特征，制备病毒标准品质粒，收集病原体样本，利用GenBank下载4种病毒的核苷酸序列，根据4种病毒的序列特征，利用GeXPexpressProfiler设计特异性引物，优化条件使GeXP系统能够特异性、快速的检测对应病毒。评价其灵敏度、特异性及功效，并应用于120份临床标本检测。结果优化后的引物能特异性的检测各病毒，无交叉反应；灵敏度为100％，特异性为99．53％，功效为99．62％，与荧光定量PCR检测结果一致性为99．51％，检测浓度最低至5×10^3／μl拷贝，在已知临床样本灵敏度高、特异性好。结论GeXP方法的建立为快速、准确的检测这4种腹泻病毒提供了便利，对口岸突发群体性腹泻的病原体检出有重要意义。

摘要：〔目的〕构建蜡样芽胞杆菌16s-23sITS重组质粒,为实时荧光PCR检测蜡样芽胞杆菌提供质粒标准。〔方法〕选择蜡样芽胞杆菌16s-23sITS特异基因作为目的靶序列,设计、合成引物和探针,采用普通PCR扩增特异靶序列,克隆到pGM-T载体后,转化感受态大肠埃希菌DH5,α经蓝白斑筛选,再分别用EcoRI酶切,普通PCR及测序3种方法证实目的片段已成功重组。建立荧光定量PCR检测蜡样芽胞杆菌的标准曲线。〔结果〕成功构建目的重组质粒,并以此为标准制作荧光定量PCR标准曲线,重组质粒标准具有较大的线性范围(102copies/μl～108copies/lμ)和灵敏度。〔结论〕该方法构建的16s-23sITS基因重组质粒能满足实时荧光定量测定对参考标准的要求,为后续实时荧光PCR快速检测蜡样芽胞杆菌的推广应用提供了条件。