摘要：该研究旨在构建Cc10基因敲除小鼠模型,并利用屋尘螨(HDM)诱导的哮喘模型,分析Cc10基因缺失小鼠的气道炎症表型。采用CRISPR/Cas9技术,设计并体外转录针对Cc10基因2号外显子的sgRNA和Cas9表达载体,显微注射至受精卵后获得F0代基因敲除小鼠,通过进一步繁育和筛选,最终获得稳定遗传的Cc10^(-/-)小鼠。利用HDM致敏和激发诱导小鼠过敏性哮喘模型,通过分析肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及其分类计数、2型炎性相关细胞因子、肺组织PAS染色及Muc5ac mRNA的表达水平来评估Cc10基因缺失对小鼠气道炎症表型的影响。PCR扩增及测序结果显示,Cc10基因被成功敲除。Western blot分析表明,Cc10^(-/-)小鼠肺组织中CC10蛋白表达缺失。Cc10^(-/-)哮喘模型小鼠BALF中白细胞总数显著高于野生型(WT)哮喘模型组,且各分类细胞(中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞和嗜碱性粒细胞)数量均显著增加。Cc10^(-/-)哮喘模型小鼠BALF中2型炎性相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13水平显著高于野生型(WT)哮喘模型组。肺组织PAS染色结果显示,Cc10^(-/-)哮喘模型小鼠具有更显著的支气管壁增厚、杯状细胞增生等病理变化,PAS染色评分显著高于WT哮喘模型组。PCR结果显示,Cc10^(-/-)哮喘模型小鼠肺组织Muc5ac mRNA表达水平显著高于WT哮喘模型组。该研究成功构建了Cc10基因敲除小鼠模型,并证明了Cc10基因缺失导致哮喘小鼠气道炎症加重,气道黏液分泌增多,提示CC10在调控气道炎症中发挥重要作用。该模型将为探索CC10在哮喘及其他呼吸系统疾病中的作用机制提供重要工具。

摘要：针灸临床疗效评价是针灸国际化发展遇到的瓶颈问题。建立针灸临床试验设计与实施过程中对照穴选取统一标准,将有助于提高临床试验结论的认可度。该文总结了目前国际针灸临床试验指南与相关试验报告,结合针灸临床医学自身特点,建立针灸临床试验对照穴选取原则。针灸临床试验方案设计过程中,应当遵循综合考虑疾病因素、节段性神经分布因素、触觉两点辨别阈因素、经络理论因素、腧穴主治功能因素5类因素的对照穴选取原则,这符合针灸疗法的特点,为今后针灸临床试验设计提供可参考依据。