摘要：在利用建立的聚合酶链反应（PCR）技术测定尿中人巨细胞病毒（HCMV）的方法中,自行设计并合成了两对HCMV的DNA引物。经实验证明,这两对引物是HCMV特异和保守的顺序,对正常人基因组DNA和其它疱疹病毒无交叉反应。本方法可测出少至1015g（1 fg）的病毒DNA。对47例疑为HCMV感染患儿的检测结果和病毒分离法测定结果相比较,其中31例两者皆为阳性;12例皆为阴性,4例本方法狲定阳性,病毒分离法为阴性,但同时测定血清HCMV-1gM呈阳性反应,支持本方法的结果。以上结果表明,本方法的特异性和敏感性都不低于病毒分离法,并具有操作简便、反应周期短、对长期保存并已消失感染性的样品也有效等优点,适于临床推广。

摘要：本文利用ＰＣＲ技术建立一种对ＨＳＶ直接基因分型的方法。在ＨＳＶ－Ⅰ、Ⅱ两型的ＤＮＡ多聚酶基因上设计了一条两型共同的上游引物（ＨＤＰ－Ｂ）和两条型特异的下游引物（ＨＤＰ－１、ＨＤＰ－２）。三条引物共同组成一个扩增反应体系，在ＨＳＶ－Ⅰ产生５４３ｂｐ条带，ＨＳＶ－Ⅱ产生３７２ｂｐ条带，据此在基因水平上对ＨＳＶ进行分型。５株不同来源的ＨＳＶ（２株Ⅰ型，３株Ⅱ型）分型结果与病毒分离及血清学方法完全一致。该反应体系与其它来源的ＤＮＡ不产生特异反应，敏感性可达１ｆｇ。应用该法对１５１份临床可疑ＨＳＶ感染的标本进行检测并分型，结果与免疫学方法完全一致。

摘要：目的研究有效的防治血管术后再狭窄的方法，以及应用反义ｃｍｙｃ、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）基因片断来封闭其相应基因表达的可行性。方法设计并合成ｃｍｙｃ、ＰＣＮＡ正义、反义及四个碱基错配的反义寡核苷酸，经体外稳定性检测和细胞转染实验证实其有效性后，分别作用于体外培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ），应用逆转录ＰＣＲ半定量测定及计算机图像分析的方法，观测其对ｃｍｙｃ、ＰＣＮＡ基因表达的影响。结果设计合成的寡核苷酸在血清培养基中１～５天未被完全降解；寡核苷酸能顺利进入ＶＳＭＣｓ内；１０μｍｏｌ／Ｌ浓度的反义ｃｍｙｃ、ＰＣＮＡ作用于ＶＳＭＣｓ后１～５天，其相应的ｃｍｙｃ和ＰＣＮＡ基因表达减弱，计算机图像分析表明其表达产物与对照组相比差异有显著意义（Ｐ＜０．０５），而正义和错配反义寡核苷酸无此效应（Ｐ＞０．０５）。

摘要：根据TCRδ基因的Vδ_2和Dδ_3、Jδ之间内含子序列设计两端引物，建立了TCRδ基因的Vδ_2－Dδ_3不完全重排半嵌套式PCR检测方法。对57例非何杰金氏淋巴瘤（NHL）进行分析，52．6％获得阳性结果；而正常人外周血淋巴细胞、淋巴结反应性增生及淋巴结转移性癌均为阴性。在此基础上，又建立了PCR－SSCP银染检测方法进行分析，阳性病例呈现一系列清晰条带，而阴性者呈模糊涂片现象。PCR及PCR－SSCP两种方法分析结果一致，说明它们均可应用于TCRδ基因重排研究，区分淋巴系细胞的单克隆性或多克隆性增生，确定肿瘤的克隆性，可以作为NHL的一种基因标志用于淋巴瘤的诊断，并有助于分析淋巴细胞的情况。

摘要：目的探讨以腺病毒载体局部应用血管内皮细胞生长因子基因对大鼠缺血随意型皮瓣成活的影响。方法30只SD大鼠随机分成3组,每组10只,于鼠背设计蒂在尾侧髂嵴水平的随意型皮瓣,面积为2cm×8cm,A组皮瓣远端23顺皮瓣长轴分10个点真皮下注入1012PFU的携带人血管内皮细胞生长因子基因的腺病毒(AdCMVVEGF),B组同法注入同剂量的携带β半乳糖苷酶基因的腺病毒(AdCMVGal),C组注入1ml的生理盐水,3d后掀起皮瓣并原位缝合,术后7d观察实验结果。结果每组皮瓣成活面积的百分比分别为A组(8591±254)%,B组为(5956±118)%,C组为(6148±109)%,A组成活率显著高于B组和C组,差异有非常显著性意义(P005)。原位杂交、免疫组化显示,应用AdCMVVEGF治疗的成活皮瓣中,VEGF有表达,组织学切片显示,AdCMVVEGF治疗皮瓣中肉芽组织增生,新生血管大量形成。结论以腺病毒为载体局部应用VEGF基因能增加缺血皮瓣的成活面积,该法具有高效的特点。

摘要：我室应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，采用自行设计和合成的三条引物（一条为两型共同引物，两条为两型特异引物）组成一个反应扩增体系，对６３例羊水或绒毛、１４例畸胎组织、１００例宫颈分泌物及５０例宫颈石蜡包埋切片进行单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的检测，其阳性率分别为４．８％，１４．３％，１６％及１０％。阳性标本中９０％是ＨＳＶ－Ⅱ，１０％为ＨＳＶⅠ型或Ⅰ＋Ⅱ型混合感染。提示：ＨＳＶ－Ⅱ感染与胎儿先天性畸形有关，与宫颈组织炎性浸润、细胞过度增生也有关系。

摘要：已知巨细胞病毒是婴儿肝炎综合征的常见病原之一,但临床生存诊断困难,且没有确切感染率的报道。根本原因在于,过去没有一种迅速、准确的辅助诊断方法。我们利用基因数据库资料,设计了两对引物,并建立了聚合酶链反应法检测巨细胞病毒技术。该技术反应时间短,结果准确可靠,无交叉反应。我们检测了138例临床诊断为婴儿肝炎综合征的患儿,其中75例检出尿中带病毒,阳性率为66.96％。对照组正常婴儿34名,仅5名尿中查到病毒,阳率性为14.70％。具显著差异(P<0.01)。实验证明,聚合酶链反应法辅助诊断巨细胞病毒感染性婴儿肝炎综合征可靠、可行。数据表明,巨细胞病毒感染在婴儿肝炎综合征中占首要地位。

摘要：根据ＴＣＲδ基因的Ｖδ２和Ｄδ３、Ｊδ之间内含子序列设计两端引物，建立了ＴＣＲδ基因的Ｖδ２～Ｄδ３不完全重排半嵌套式ＰＣＲ检测方法，对５７例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）进行分析，５２．６％获得阳性结果；而正常人外周血淋巴细胞、淋巴结反应性增生及淋巴结转移性癌均为阴性，在此基础上，又建立了ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染检测方法进行分析，阳性病例呈现一系列清晰条带，而阴性者呈现模糊涂片现象，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ两种方法分析的结果一致，说明二者均可应用于ＴＣＲδ基因重排研究，区别淋巴系细胞的单克隆性或多克隆增生，确定肿瘤的克隆性，可以作为ＮＨＬ的一种基因标志用于淋巴瘤的诊断，并有助于分析淋巴细胞的分化情况。

摘要：目的：评价不同透析膜血液透析的生物相容性。方法：定量反转录多聚酶链反应、细胞原位杂交技术和酶联免疫吸附方法。结果：在分组设计与拉丁交叉设计中，ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α及ＩＬ－６血浆水平无论铜仿膜、聚甲基丙烯酸甲酯膜（ＰＭＭＡ）或聚砜膜血透时各组间差异不明显（Ｐ值均＞０．０５）；ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α与ＩＬ－６ｍＲＮＡ在正常人外周血单个核细胞中无表达，而尿毒症未透析患者和血透患者外周血单个核细胞中均有表达，其中血透者的表达水平明显高于尿毒症未透析患者。反转录多聚酶链反应和细胞原位杂交检测发现铜仿膜血透时各细胞因子基因表达水平均显著高于ＰＭＭＡ与聚砜膜（Ｐ＜０．００１），而ＰＭＭＡ与聚砜膜间无差异（Ｐ＞０．０５）。结论：尿毒症（未透析）及血透均可激活外周血单个核细胞。从细胞因子基因表达水平看，铜仿膜生物相容性较ＰＭＭＡ与聚砜膜差。作者认为这一方法在评价透析膜的生物相容性上优于血浆水平测定。

摘要：用ＰＣＲ方法检测人骨髓细胞微小病毒Ｂ１９ＤＮＡ。设计了二对特异引物，ＰＣＲ反应后，出现期望６９９ｂｎ及３１５ｂｐ条带。并用Ｂ１９特异探针确认其特异性；套式ＰＣＲ灵敏度可达１ｆｇ。１％ＮＰ－４０法处理样品简便实用。分析５０例选择性临床血液病患者骨髓涂片，发现有明显贫血症状的血液病存在较高的Ｂ１９感染率。