摘要：探讨了酶解龙头鱼蛋白提取低分子肽的具体工艺.通过酶种类的选择,确定了外切蛋白酶作为水解酶,并以此为基础应用四因子二次回归旋转正交设计和响应面分析,探讨龙头鱼酶解工艺.结果表明,酶用量0.097g/5g鱼糜,温度51℃,时间4h.,就可达到较高的水解度(45.5%).在实验条件下,pH对水解工艺的影响不显著.此后增加酶用量,提高温度,延长时间对水解度增加影响不大,三维响应曲面趋于平缓;另外,酶解温度和时间存在一定的交互作用.通过工艺优化,我们获得无苦味,具良好鲜味,营养价值高的蛋白质制品.

摘要：为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SODcDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比),引起其编码第116个氨基酸由G变为D.采用定向克隆的方法将hCu Zn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上,构建表达质粒pGEX-SOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析证实,经IPTG诱导,融合蛋白GST-SOD获得高效表达.破碎菌体、上清经谷胱甘肽亲和层析初步纯化后,得到纯度达90%的目的蛋白.活性实验表明,GST-SOD具有生物活性.