摘要：为了建立犬瘟热病毒(CDV)强弱毒株的鉴别PCR检测方法,根据犬瘟热病毒强弱毒株H基因的保守区域各设计了两对特异性引物,制备阳性对照模板,优化反应体系及反应程序;采集CDV自然感染犬只病料样本,利用该方法和胶体金试纸条进行对比检测。结果表明,PCR产物扩增判断为356 bp,最佳扩增体系20μL,最佳模板浓度为5ng/μL,最佳引物浓度6.25μmol/L,最佳退火时间为5 s,最佳延伸温度为15 s,最佳循环数40。CDV感染犬表现出明显的神经症状,对血液样本的检测结果表明,该方法和胶体金符合率100%;PCR检测结果显示心脏和脾脏为CDV核酸阳性,肝脏、肺脏、肾脏、十二指肠(含肠内容物)为CDV核酸阴性。该方法扩增效率高、特异性好,可区分疫苗毒株和野生型毒株,为有效诊断CDV并鉴别强弱毒株提供了保证和技术支撑。