摘要：为建立一种敏感、特异、高通量的猪伪狂犬病毒(PRV)野毒抗体血清学检测方法,本研究利用原核表达技术表达了猪伪狂犬病毒gE蛋白,以纯化的重组gE蛋白为包被抗原建立了检测猪伪狂犬病毒野毒抗体的间接ELISA方法。参照已发表的PRV基因组gE基因序列,设计合成1对特异性引物,PCR扩增了长约606 bp的gE基因片段,将目的片段亚克隆至pET30a原核表达载体中,经IPTG诱导重组gE蛋白的表达,重组蛋白纯化后,免疫印迹检测证明具有良好的抗原性和特异性。以纯化蛋白为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测伪狂犬病毒野毒抗体的间接ELISA方法,该方法检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、PRV疫苗毒的阳性血清均为阴性;该方法批内与批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;该方法与IDEXX gE-ELISA抗体检测试剂盒的符合率为96.2%。本研究建立的gE-ELISA检测方法为PRV野毒抗体检测以及野毒感染的快速诊断与流行病学调查等提供了一种简便、快速、高通量的血清学检测方法。

摘要：当前奶牛规模养殖业发展存在诸多制约因素,其主要问题是土地资源紧张,用地无规划;盲目投入;选址规划设计不科学;专业技术人才匮乏;疫病防控意识淡薄;违规使用添加剂、药物;抗风险能力不强;环境污染严重;组织化程度低:服务队伍素质不高等,针对性地提出了几条应对策略,与同行交流学习。

摘要：当前牦牛规模养殖业存在诸多制约因素,主要问题是盲目投入;选址规划设计不科学;疫病防控意识不强,违规使用添加剂、药物;抗风险能力不强;环境污染严重;组织化程度低;养殖场(户)都是外行等,针对以上不足,本文浅谈几点应对策略,进行交流学习。