摘要：目的分析LDLR基因敲除小鼠体内脂代谢相关基因ApoB100、PPARα、LXRα以及ABCA1与野生型相比表达水平的差异情况。方法应用多重PCR的方法对LDLR-/-小鼠基因型进行鉴定;接着分别对LDLR-/-小鼠和野生型小鼠脂代谢相关基因的mRNA相对丰度以及蛋白表达水平进行qRT-PCR、ELISA分析。结果与野生型相比,LDLR-/-小鼠中ApoB100、PPARα的mRNA及蛋白表达均上调(P<0.05);ABCA1的表达水平下降(P<0.01),蛋白水平上的下降幅度更为明显;而LXRα不管在mRNA或蛋白水平上均检测不到差异表达。结论 LDLR基因功能的缺失对不同的脂类代谢相关基因的表达产生不同的影响。本研究有助于人们进一步了解家族性高胆固醇血症的发病机制,同时也为药物设计中靶位点的选择提供参考价值。

摘要：目的:探讨设计性实验在生物化学实验教学中的效果。方法:选取100名2年级临床医学专业本科学生为研究对象,在掌握了基本的实验技术基础上,教师规定以"某种蛋白质或酶的分离、纯化及鉴定"为设计性实验的内容,学生首先分组,查阅文献,撰写实验方案;然后进行PPT汇报,师生交流,确定可行的设计方案;最后完成实验,并对实验结果和教学效果进行评价。结果:发放问卷调查表100份,收回99份,问卷回收率为99%。100%的学生认为设计性实验能提高学习积极性和学习兴趣,培养自学及独立思考能力,98%的学生认为可继续在生物化学实验教学中开展设计性实验教学。结论:在生物化学实验教学中开展设计性实验可取得良好的教学效果。

摘要：医学生物化学实验课程教学是其理论课程教学的重要补充。传统实验教案设计合理、条件优化,学生难以建立整体实验设计的思维模式。“缺陷性实验”在原实验案例基础上,通过针对性破坏实验中重要环节的完整性和严谨性,主动形成“缺陷”,为培养学生科学的实验思维,强化其发现问题、解决问题的能力,提供了新的教学模板。文章围绕“缺陷性实验”案例的创建,设计思路,实施及应用意义等进行探讨,以期为新时代教育背景下,医学生物化学实验课程的教学实践提供新的线索和思路。

摘要：目的:探讨开放性实验在生物化学实验教学改革中的效果。方法:随机选取6个实验组共50名同学为研究对象,在完成常规实验教学任务的前提下,学生自己设计实验、准备实验、操作实验、撰写实验报告,通过师生恳谈、调查问卷的方式,评价教学效果。结果:6个实验组自行设计实验5个,完成4个;50份学生问卷收回48份,回收率96%;93%以上学生对开放实验室持认同态度。结论:生物化学实验课开放实验室在一定程度上有利于培养学生实践能力和创新能力。

摘要：目的:构建人Spsb1基因的shRNA慢病毒干扰载体,为研究该基因在肝癌细胞生长、增殖、转移和浸润中的作用打下前期基础。方法:根据shRNA的设计原则设计一段shRNA和阴性对照shRNA,化学合成DNA双链中的两条单链,通过退火和配对后与慢病毒干扰载体LV-3(p GLVH1/GFP+Puro)连接,阳性克隆子LV3-Spsb1测序鉴定;将LV3-Spsb1和辅助质粒p CMV-delta8.91/p CMV-VSVG共转染HEK293T细胞,转染后24 h在荧光显微镜下观察细胞转染效率;用转染后收集到的病毒液感染肝癌细胞SMMC-7721,荧光显微镜下观察细胞荧光;用1 mg/L嘌呤霉素杀死未感染的细胞,Western blot检测细胞内源性Spsb1基因表达量。结果:测序鉴定证明获得的LV3-Spsb1质粒是所需要的目的慢病毒shRNA干扰载体;通过与辅助质粒共转染HEK293T细胞后,细胞在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光,提示细胞转染效率较高;病毒液感染SMMC-7721后,细胞内出现绿色荧光,证明共转染系统可以成功包装shRNA-Spsb1重组慢病毒颗粒;Western blot结果显示shRNA-Spsb1重组慢病毒能够抑制细胞内Spsb1基因表达,证明shRNA-Spsb1的确可以降低肝癌细胞内源性Spsb1基因表达,可用于后期的基因功能研究。结论:成功构建人Spsb1基因的慢病毒shRNA干扰载体LV3-Spsb1并包装出其慢病毒颗粒。