摘要：本研究设计了一对特异性引物NSM1/NSM2,对三株广西狂犬病病毒NS和M基因同时进行了RT-PCR扩增、克隆和测序.同源性分析表明,三株广西野毒NS基因核苷酸同源性为87.2%～98.4%,M基因核苷酸同源性为90.1%～99.7%;与固定毒和狂犬病相关病毒比较,NS基因分别为79.9%～82.8%和69.7%～71.0%;M基因的分别为82.8%～87.8%和75.0%～77.8%.三株野毒NS基因氨基酸同源性为93.3%～98.7%,M基因氨基酸同源性分别为97.5%～100%.表明广西各地毒株之间亲缘关系不同,但最为相近;与狂犬病固定毒株亲缘关系较远;与狂犬病相关病毒亲缘关系最远.

摘要：本研究在黄喉拟水龟中分离的肺炎克雷伯菌基础上,根据肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛的Mrk D基因序列设计引物,通过对SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR反应条件、特异性、灵敏性实验进行调节优化,建立了肺炎克雷伯菌的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。研究结果表明,建立的肺炎克雷伯菌荧光定量PCR方法,检测时间短,用时73 min;特异性强,对非肺炎克雷伯菌无交叉反应;灵敏度高,检测肺炎克雷伯菌DNA的最低检测量为2.78 fg。该方法的建立,为肺炎克雷伯菌的辅助诊断、流行病学调查、毒力基因的分析提供科学借鉴。

摘要：根据创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的溶细胞毒素基因序列和哈氏弧菌(Vibrio harveyi)的toxR基因序列,分别设计并合成两对特异性引物,通过PCR反应条件优化,测试两种菌的特异性和敏感性,建立双重PCR方法,同时快速检测***和***。结果表明:纯培养***和***的检测灵敏度分别是12 cfu/mL和18 cfu/mL,与无乳链球菌、海豚链球菌、副溶血弧菌及美人发光杆菌无交叉反应;此PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性,具快速、高效等优点,对细菌***和***诊断与防治具有较好的临床应用性。