摘要：[目的]克隆带有His标签的人神经生长因子β基因(human nerve growth factor beta,hNGF"β),并构建hNGF"β与EGFP基因复制缺陷型腺病毒载体,为hNGF蛋白的表达、纯化及对其进行神经损伤的应用研究奠定基础。[方法]用Trizol试剂提取人胎肝总RNA,应用RT-PCR方法以自行设计的带有His标签的引物来扩增NGF"β基因;将所扩增的NGF"β基因经酶切、纯化,与IRES-EGFP片段共同插入到Pshuttle-cmv载体中,测序后,利用基因同源重组技术构建hNGF基因的复制缺陷型腺病毒载体AdNGF"β,经鉴定,转染HEK293细胞,观察EGFP表达并检测重组腺病毒的病毒滴度。[结果]克隆的hNGF基因序列与GenBank中的hNGF基因序列完全一致并在3′端携带上His标签;重组腺病毒载体AdNGF-β经PacⅠ酶切得到大于23.0和4.5或2.9kb大小的2个片段,表明同源重组成功。2种重组腺病毒经脂质体介导转染293细胞后,均可观察到绿色荧光蛋白。收获病毒并测定感染滴度分别为1.00×109和0.99×109pfu/ml。[结论]克隆了带有His标签的hNGF"β基因,并成功构建了重组腺病毒载体,为hNGF蛋白的表达、纯化及对其进行神经损伤研究奠定基础。

摘要：基因工程是一门理论和实验并重的专业基础课,必须适应当今教育要求,重点培养学生综合素质和能力。CDIO工程教育模式利用教育理念及方法系统指导工程训练模式。本文从教学整体设计思路、教学方法和手段、教学过程和课程考核等方面,突出对学生基因工程课程理论与实践结合能力及工程能力的培养,旨在不断增强学生学习的主导型,从而全面提高学生综合素质。

摘要：在OBE理念下,以培养目标和毕业要求为出发点,设计科学合理的培养方案和课程大纲,文章以燕山大学健康教育类通识选修课建设为例,主要从课程的一体化设计、教学活动组织、方法与手段等方面,讨论了健康教育类课程“产出导向”设计的基本要求,以期达到预期的培养要求。