摘要：目的:针对活的沙门菌,建立快速检测的方法。方法:以沙门菌OmpC基因RNA为检测对象,针对其设计荧光定量PCR引物和探针,摸索合适的反应体系和反应条件,同时以沙门菌及其亲缘关系较近的对照菌株进行特异性实验,以PCR产物克隆质粒和沙门菌纯培养物梯度稀释进行灵敏度实验,最终建立食源性沙门菌快速检测逆转录实时荧光PCR方法。结果:所设计的S-F/S-R引物和S-Probe探针能有效地将沙门菌与其他亲缘关系较近的肠杆菌科细菌如金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、志贺菌等区分开来。该方法对沙门菌纯培养物梯度稀释后的检测下限为<10 CFU/25 ml。同时,将建立的RNA逆转录荧光定量PCR检测方法与DNA荧光定量检测方法进行比较,DNA荧光定量PCR灵敏度仅为103 CFU/ml,远低于逆转录荧光定量PCR,且逆转录荧光定量PCR针对RNA进行检测,与活的沙门菌相关联,准确度更高。结论:建立沙门菌逆转录荧光定量PCR检测技术,具有特异、灵敏、快捷的特点,适用于食品中沙门菌的快速检测。

摘要：建立适合食源性沙门氏菌的RT-PCR检测体系。根据沙门氏菌的转录起始因子rpoD设计引物Salmrpod2/5,以rpoD基因的mRNA为检测对象,在样品制备时采用新型的磁性纳米粒子分离mRNA技术,建立快速检测食品中沙门氏菌的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法。结果表明,Salmrpod2/5引物能有效地将沙门氏菌与其他亲缘关系较近的肠杆菌科细菌区分开来。样品中沙门氏菌添加实验表明,该方法对沙门氏菌的检测下限为10CFU/25ml,检测时间少于18h。该方法具有灵敏、特异、快速的特点,适宜于在食品卫生行业中进行推广及应用。

摘要：设计并实施乳粉中黄曲霉毒素M_1(aflatoxin M_1,AFM_1)的检测能力验证计划,了解和评价实验室检测乳粉中AFM_1的检测能力和水平,识别实验室间存在的差异,促进实验室提高检测水平。参照CNAS—CL002《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》制备分割水平对的样品,采用单因素方差分析和t检验对样品均匀性和稳定性进行分析。对能力验证结果进行稳健统计分析,通过Z值比分数评价实验室能力。结果表明:样品通过均匀性和稳定性的检验要求,满足能力验证计划要求;参加实验室49家,满意结果数为45家,满意率为91.8%;多数参加实验室的检测能力评价为满意,表明乳粉中AFM_1的检测水平总体良好。实验操作误差和数据处理不当是个别实验室结果离群的主要原因。

摘要：为了建立一种快速检测食品中单增李斯特菌的方法,试验设计了Listeriolysin O、23SrRNA和hly、iap四对引物分别做双重PCR引物,并与免疫磁珠法分离LMO相结合对LMO进行快速鉴定。结果显示,这四对引物分别扩增条带为700bp,240bp,308bp,505bp,可分辨不同种属的李斯特菌和其它不同菌株。建立的IMS-PCR方法最低检测限可达到1CFU/25g(mL)食品,通过检测食品样本188份,结果与常规检测方法所得的结果一致率为100%。所以,建立的IMS-PCR方法具有极好的特异性、敏感性和稳定性,在24h内可得到准确的检测结果,具有广阔的发展和市场应用前景。

摘要：目的设计组织乳粉中烟酸、烟酰胺含量测定能力验证项目,评价实验室检测配方乳粉中烟酸、烟酰胺的技术能力和水平。方法考核样品中的烟酸、烟酰胺在P<0.05显著水平时是否均匀,且在整个计划周期内稳定、满足能力验证的要求。通过实施本次能力验证计划,采用Z比分法对来自20个省(自治区)、直辖市的49家实验室的测定结果和检测能力进行评价。结果在参加实验室中,烟酸、烟酰胺初测满意率为91.8%,补测后总体满意率为100%。结论所有参加实验室检测能力结果满意,表明乳粉中烟酸、烟酰胺检测水平总体良好。对离群结果进行技术分析,可以帮助实验室查找原因并进行整改。