摘要：【目的】稻瘟病是水稻生产上的重要限制因素,挖掘与利用抗病基因是实现水稻高产稳产的重要保障。前期研究发现,稻瘟病抗性相关osa-miR-21可能通过靶向调控多胺氧化酶基因OsPAO4调节水稻稻瘟病抗性,但目前多胺氧化酶(Polyamine oxidases,PAOs)在水稻抗病中的功能研究尚未见报道。为进一步探究其在水稻抗病中的可能生物学功能,本研究利用CRISPR/Cas9编辑技术对水稻OsPAO4基因进行定点编辑并对其后代突变体进行分析。【方法】在OsPAO4第2外显子处设计了1个20 bp的编辑靶点,将靶点核苷酸片段克隆至pRGEB32载体,获得OsPAO4编辑载体。随后,利用农杆菌介导法转化水稻Pik-H4 NIL愈伤组织中,经过再生培养、潮霉素检测获得转基因阳性植株,并对T_(0)代植株靶位点附近DNA序列进行PCR和测序分析。【结果】OsPAO4基因被成功编辑,最终获得25个转基因阳性植株,并在T_(0)代产生多种突变类型:3株纯合突变、18株杂合突变和4株未发生编辑的植株。此外,T_(0)代杂合突变ospao4-8的颖壳颜色由紫色变为深灰色,且ospao4突变体中过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性有所升高,推测OsPAO4可能参与水稻的基础免疫过程。【结论】创制了多种类型ospao4突变体材料,初步确定OsPAO4可能参与水稻免疫过程的调控,为进一步深入揭示OsPAO4基因的具体生物学功能和分子调控机制奠定了重要基础。

摘要：本文在分析橡皮囊成形模具结构特点的基础上提出了橡皮囊成形模具快速设计的方法：并以弯边类钣金件为例，利用CATIA二次开发技术，开发了橡皮囊成形模具快速设计系统。

摘要：标准件库在飞机工装数字化设计中起到重要作用,建立适合工装快速设计的标准件库是提高设计效率的关键问题之一。在比较目前现有建立标准件库的两种方法的基础上,针对标准件在工装中的定位问题,以标准件草图为核心,提出了基于快速设计的标准件库建立的方法;通过分析本地数据库与远程数据库特点,提出了标准件库数据库的方法;将基于快速设计的标准件库应用于橡皮囊成形模具快速设计系统,缩短了模具设计周期,提高了模具设计效率。