摘要：目的运用慢病毒载体系统构建人微小非编码RNA(miR-203)的重组慢病毒载体,并感染人慢性粒细胞白血病细胞(K562),观察其对K562细胞增殖与凋亡的影响。方法合成miR-203的前体序列,克隆至pLVX-IRES-ZsGreen1载体中构建成重组慢病毒质粒pLVX-shRNA2-miR-203(PremiR-203)。经酶切和测序鉴定后,采用脂质体将其与包装质粒PLD2及包膜质粒PLD3共转染293T和K562细胞。荧光显微镜观察293T和K562细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达。QRT-PCR检测miR-203在K562细胞中的表达水平,MTT实验检测对K562细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞周期,TUNEL染色观察细胞凋亡形态。采用完全随机设计的单因素方差分析组间差异的显著性。结果经酶切鉴定和核酸序列测定,293T细胞中GFP表达证实成功包装了携带miR-203基因的重组慢病毒,滴度为1.2×108 TU/mL。重组慢病毒感染K562细胞后,细胞中miR-203基因呈高表达;PremiR-203对K562细胞增殖抑制率24h为(8.10±0.15)%,高于阴性对照组的(5.16±0.14)%,F=3 499.1,P<0.001;48h为(32.4±0.49)%,明显高于阴性对照组的(6.4±0.19)%,F=9439.3,P<0.001;72h为(59.0±0.53)%,F=32 865.16,P<0.001。流式细胞术结果显示,细胞周期比例G1期为38%,S期为54%,G2期为8%。荧光显微镜观察到细胞核碎裂、核质固缩、细胞膜突出等典型的凋亡形态。结论成功构建重组慢病毒介导hsa-miR-203的表达载体,实现了其在细胞中的稳定表达,并有效抑制K562细胞增殖,并促进细胞凋亡。

摘要：目的研究原花青素联合凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族成员Apollon小干扰RNA(small interfer-ence RNA,siRNA)对人肝癌(HepG2)细胞增殖、凋亡的影响。方法设计并合成Apollon siRNA的序列,将一定浓度的人工合成的Apollon siRNA经脂质体包裹转染肝癌(HepG2)细胞,运用实时荧光定量RT-PCR检测Apollon mRNA的表达水平,蛋白质免疫印记技术检测Apollon的蛋白表达水平,并筛选出Apollon siRNA的有效序列,并进一步联合不同浓度的原花青素作用于肝癌(HepG2)细胞48 h后,采用WST-8法检测单用Apollon siRNA、单用原花青素、及Apollon siRNA联合原花青素对肝癌细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞早期凋亡率;Hoechst 33258染色观察HepG2细胞凋亡形态。结果设计的三对Apollon siRNA序列,筛选出其中有一对(NO.2)能明显下调Apollon mRNA与蛋白的表达水平,Apollon siRNA联合原花青素作用于HepG2细胞48 h后,单用原花青素的IC50为25.24 mg.L-1;Apollon siRNA与原花青素联合使用,原花青素的IC50为9.99 mg.L-1,增敏倍数为2.53,表现为协同作用。流式细胞术检测结果显示:Apollon siRNA联合原花青素能促进HepG2细胞凋亡,其早期凋亡率达25.2%;经荧光显微镜观察,Apollon siRNA组可见核高强度荧光的细胞,并见凋亡小体。结论 Apollon siRNA可增强肝癌细胞对原花青素的敏感性,作用机制可能为共同促进肝癌细胞早期凋亡有关,为临床上肝癌的治疗提供理论基础。

摘要：目的:观察抑制hsa-miR-204表达对人急性淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)生长与凋亡的影响。方法:设计合成hsa-miR-204的反义核苷酸序列(AMO-miR-204)并用脂质体转染法将其转染MOLT-4细胞。Q-PCR检测hsa-miR-204的表达量。噻唑蓝(MTT)试验和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞早期凋亡率。Transwell检测细胞侵袭能力。结果:AMO-miR-204可抑制hsa-miR-204的表达,以反义核酸浓度为0.6μmol/L时,下调最为明显(P<0.05)。MTT实验示AMO-miR-204的最佳转染抑制浓度为0.6μmol/L。AMO6组细胞平板克隆形成能力明显减弱[(29±8)%],差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测AMO6组细胞凋亡达(7.47%)。Transwell细胞侵袭能力实验示AMO6组细胞侵袭能力较其余两组减弱。结论:AMO-miR-204能有效抑制MOLT-4细胞的增殖,并促进其凋亡。hsamiR-204有可能作为急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)基因治疗的靶基因,同时也为深入揭示ALL的发生和发展机制提供了实验依据。

摘要：市政排水检查井原位固化修复技术是管道原位固化修复法的延伸,修复后的检查井具有高强度、耐腐蚀、整体性好的特点,施工方便,对周围环境影响较小,是一种安全可靠的检查井整体修复方法。结合上海市宝山区大华三路排水检查井修复施工案例,对比分析了几种常用检查井的非开挖修复方法,详细介绍了原位固化法的内衬材料设计、施工流程、关键技术点、施工质量验收。经检验,修复各项指标均达到了国内外相关标准要求,以期为检查井原位固化修复设计与施工提供参考。

摘要：为避免消防员在灭火过程中发生意外,文中设计了一款体感消防机器人。该机器人采用体感技术,可通过人体头部、手臂的运动远程控制机器人做相应的动作,同时该机器人还可携带多种传感器,将现场实时环测参数传回客户端,方便消防员分析现场情况,及时完成灭火任务。

摘要：针对现有应用管理平台在云储存服务器托管过程中资源过度消耗的问题,本研究利用Docker容器设计了一套应用部署管理平台,由Spring MVC框架编写Web管理界面,并选择虚拟机建立私有注册表保存预先设计的应用部署管理程序,实现了自动化巡视、自动化部署和自动化配置3个方面的应用部署管理。为了验证Docker容器机制的即时有效性,同时选取CBSD机制对自动化巡视子系统的应用程序中不同Slave节点运行时间进行对比,结果表明:当节点数量为200和400时,CBSD机制处理时间约为Docker容器机制的2倍和6倍,随着应用程序的节点数量的增加,Docker容器的处理方式优势显著。

摘要：针对目前电网信息系统处理日志数据量大且系统处理速度慢的问题,根据现有数据处理系统以及基于神经网络的数据分析方法,通过利用Flume数据采集系统、主从结构模型HDFS和并行编程模式的Map Reduce综合支持的数据调用程序,优化传统的广义神经网络算法,提高系统分析数据做出响应的速度。最后选取电网信息系统的部分样本进行实验测试:较其他数据处理算法来说,GRNN算法数据处理响应时间提高近52%,处理结果的准确性提高10%左右。