摘要：目的基于重组酶介导的等温扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)和规则成簇间隔短回文重复序列(cluste redregularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)-Cas13a(CRISPRassociated protein 13a)结合侧流层析技术(lateral flow assay,LFA)建立一种快速、灵敏、特异的猴痘病毒(monkeypox virus,MPXV)检测方法。方法针对MPXV的F3L段基因设计其RAA扩增引物、CRISPR RNA(crRNA)、荧光报告探针及LFA探针,对反应条件进行优化,建立RAA-CRISPR/Cas13a-LFA检测体系,评价该体系的检测灵敏度与特异性,并与实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测结果进行一致性比较,同时应用实际临床样本验证该检测体系的准确性。结果RAA-CRISPR/Cas13aLFA检测体系可以在60 min内(包括实验操作)完成检测,该体系对病毒DNA的检出限为18拷贝/反应;特异性试验表明其与水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)、单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)、EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)、柯萨奇病毒A16型(CVA16)、肠道病毒A组71型(EV-A71)、麻疹病毒(measles virus,MeV)均无交叉反应;临床样本检测结果表明,RAA-CRISPR/Cas13a-LFA与qPCR法之间的差异无统计学意义,二者具有良好的检测一致性(Kappa=0.892)。RAACRISPR/Cas13a-LFA检测体系的灵敏度和特异度分别为100.0%和83.3%,阳性预测值为96.6%,阴性预测值为100.0%。结论建立的RAA-CRISPR/Cas13a-LFA检测体系可快速、灵敏、特异地检测MPXV。

摘要：基于现代化发展背景下,城市发展中面临着洪涝灾害、水资源短缺等挑战,这些问题不仅影响着居民的生活环境,也对城市的可持续发展构成了严峻挑战。传统的城市和建设往往以“石头城市”为主导,忽视了自然生态系统与城市之间的紧密关联。然而,在应对日益严峻的环境挑战时,海绵城市理念应运而生。体现出环境友好型等特点的理念,海绵城市理念强调通过模仿自然生态系统的工作原理,将城市设计与自然环境融合,实现城市的水资源合理利用、雨水收集、洪涝调控等目标。在这一理念下,建筑设计作为城市的重要组成部分,扮演着关键的角色。本论文将通过对海绵城市理念的深入剖析,探讨建筑设计如何与之紧密结合,以实现城市的可持续发展。