摘要：为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRISPR v2载体,进行慢病毒包装与感染,筛选出LO2 POR^(KO)单克隆细胞后进行测序及Western blot鉴定。其次用同源重组方法构建pcDNA3.1(+)/myc-His B-POR重组质粒,经对POR^(KO)细胞和野生型细胞转染分别构建LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株,以G-418筛选后进行Western blotting鉴定。再用4μmol·L^(-1)及8μmol·L^(-1)AFB_(1)分别对野生型、LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株染毒48 h,观察细胞形态并测定细胞存活率。结果表明,靶向exon5的sgRNA-2可成功敲除POR基因,得到LO2 POR^(KO)细胞株;成功构建表达POR重组蛋白的LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株。对AFB_(1)处理后的各细胞存活率测定结果表明,相较于野生型LO2细胞43.66%±0.58%和27.90%±0.46%的存活率,LO2 POR^(KO)细胞存活率具有极显著性差异,均为100%(P<0.0001);LO2 PORCO细胞存活率仍有显著性差异,分别为57.07%±0.74%和42.54%±0.68%(P<0.05);LO2 POR^(OE)细胞存活率则显著降低,分别为24.58%±0.92%和17.99%±0.81%(P<0.01)。综上所述,本研究成功构建了LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株,并以AFB_(1)染毒处理分别研究了各细胞株的存活率和细胞形态学变化,发现POR基因对AFB_(1)所致细胞毒性的影响巨大。研究结果为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究奠定了基础。

摘要：目的 :调查肿瘤科护士癌性伤口管理的知识、态度、行为现状并分析其影响因素。方法 :采用便利抽样法,对687例肿瘤科护士进行问卷调查。调查工具为自行设计的一般资料问卷、肿瘤科护士癌性伤口管理知信行问卷。结果 :肿瘤科护士癌性伤口管理知识得分为(14.94±3.12)分、态度得分为(58.62±6.76)分、行为得分为(70.71±25.17)分;多元线性回归分析结果显示,职称、是否接受过伤口知识培训、对癌性伤口管理的了解程度是癌性伤口管理知识的影响因素(P<0.05);职务、是否接受过伤口知识培训、对癌性伤口管理知识的了解程度是癌性伤口管理态度的影响因素(P<0.05);医院所在城市分类、是否接受过伤口知识培训、对癌性伤口管理知识的了解程度是癌性伤口管理行为的影响因素(P<0.05)。结论 :肿瘤科护士对癌性伤口管理态度积极,但知识掌握和行为实践相对较差。护理管理者应重视肿瘤科护士在癌性伤口管理知识及技能方面的培训,进一步推动癌性伤口管理的相关工作,以期提高癌性伤口患者的护理水平。