摘要：目的调查HIV-1从供体到受体中病毒包膜序列变异情况，预测结构及其抗原性的变异趋势，为进一步的表型特征和抗HIV免疫研究奠定基础。方法从4例HIV-1感染者外周血单个核细胞中提取DNA，设计跨病毒包膜的保守引物，进行PCR扩增，将扩增产物克隆至表达质粒载体，筛选阳性克隆进行序列测定。采用生物信息学方法对其进行编码氨基酸的变异性、系统发育以及包膜抗原特征进行分析和预测。结果共获得4个病人的8个有完整开放读码框的包膜表达载体。在8个克隆中，包膜糖蛋白gp120内变异程度大的区域分别为信号肽区、可变区V1／V2区、恒定区C2区内近V3区部分、V4和V5区。变异包括点突变、氨基酸插入或缺失等。系统树分析发现所获得病毒克隆为B′型并与云南分离株LTG0218距离最近。抗原性分析结果表明，除CD4结合区相对保守外，4株病毒在多处抗原表位中呈现较大变异性。结论构建并鉴定了4例HIV-1 B′亚型感染者的8个包膜克隆的包膜表达载体。表型预测其均为R5亲嗜性毒株。生物信息学技术分析预测结果表明从供者到受者发生了包膜蛋白变异。

摘要：　　目的研究人肝再生增强因子（ALR）对细胞周期素依赖性激酶1启动子（CDK1p）转录调节的作用，探讨ALR的生物学作用机制。方法根据GenBank中CDK1p序列的分析设计引物，应用聚合酶链反应（PCR）扩增人CDK1基因启动子基因序列，并克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中，构建CDK1启动子报告基因表达载体pCAT3-CDK1p，以该质粒转染HepG2细胞系，并同时与pcDNA3.1（－）-ALR共转染HepG2细胞系，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测报告基因氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达活性。结果 pCAT3-CDK1p组CAT表达活性明显高于pCAT3-basic组，差异有统计学意义，pCAT3-CDK1p与pcDNA3.1（－）-ALR 共转染组的CAT表达活性明显低于pCAT3-CDK1p组，差异有统计学意义。结论 CDK1启动子有顺式激活下游基因的活性，ALR对CDK1基因有下调作用。