摘要：为了抑制C2C12细胞中akirin2基因的表达,试验采用siRNA表达载体法构建了靶向akirin2基因的RNA干扰(RNAi)真核表达载体。首先针对akirin2基因设计并合成了相应的干扰序列,退火后将其与RNAi表达载体psiRNA-h7SKGFPzeo进行连接,构建成干扰载体akirin2-pshRNA0、akirin2-pshRNA1。将构建好的载体通过Turbofect转染试剂转染小鼠成肌细胞C2C12,通过荧光定量PCR检测其干扰效率,经酶切和测序鉴定所构建的akirin2基因RNA干扰载体与设计序列完全相符。结果表明:重组干扰载体akirin2-pshRNA0和akirin2-pshRNA1构建成功。将重组RNAi载体转染C2C12细胞,与正常对照组相比,转染akirin2-pshRNA1组的akirin2基因mRNA相对表达量显著降低,表达量下调了60.62%(P<0.05)。说明试验构建的靶向akirin2基因的RNAi载体akirin2-pshRNA1可以有效地抑制C2C12细胞中akirin2基因的表达。

摘要：硬脂酰辅酶A去饱和酶(Stearoyl-CoA Desaturase,SCD)基因在猪的不同的组织中均有分布,高热量饮食、运动、激素等因素均会影响其基因表达水平。对SCD基因表达水平和蛋白活性的调控会直接影响猪肌肉和脂肪组织中的饱和与不饱和脂肪酸的比例,从而进一步影响机体的脂肪代谢。试验从仔猪肝脏组织中提取基因组DNA,设计含有MluI和BglII酶切位点的引物。

摘要：a-硫辛酸含有双硫五元环结构,其作为一种独特的氧化还原脱氢酶--线粒体酶系复合物的辅助因子,参与机体的葡萄糖氧化和ATP生成,在生物体内可转化为还原型二氢硫辛酸,而硫辛酸合成酶(Lipoic Acid Synthase,LIAS)可在细胞内调控α-硫辛酸的合成。试验首先从仔猪肝脏组织中提取RNA,反转录成cDNA,分别设计引物,在引物的两端加入含有EcoRI。