摘要：目的:建立同时测定大鼠血浆中替格瑞洛与美托洛尔浓度的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法,并应用该方法考察对大鼠重复给药后替格瑞洛与美托洛尔的药代动力学影响。方法:SD大鼠随机分为3组,分别为2个单给药组和1个联合给药组。大鼠行颈静脉埋管手术后48 h,分别灌胃给药替格瑞洛、美托洛尔以及合并用药。给药1周后按设计时间点经颈静脉埋管取血,获取血浆样品。血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,采用C18色谱柱,以乙腈-水溶液为流动相进行梯度洗脱,使用液相色谱-三重四级杆质谱联用仪,多重反应监测模式,电喷雾离子化源,正离子反应进行监测。结果:(1)替格瑞洛和美托洛尔的线性范围分别为6.51~800 ng/mL(R=0.9998),6.51~800 ng/mL(R=0.9995),线性关系良好,样品提取回收率均大于85%,批间与批内精密度均小于15%;(2)两药合用,替格瑞洛的达峰浓度、药时曲线下面积比单用时明显增加,清除率明显减少;美托洛尔的半衰期缩短。结论:建立的同时测定替格瑞洛与美托洛尔的LC-MS/MS方法,稳定性好,准确性高,操作简便;替格瑞洛与美托洛尔联合用药,使替格瑞洛的生物利用度升高,美托洛尔的t下降。

摘要：目的:构建慢病毒介导的人孕烷X受体(hPXR)sh-RNA干扰载体及筛选肝癌细胞稳定干扰株。方法:针对hPXR的特异性序列,设计干扰序列,构建重组克隆。转染HEK293T细胞,筛选有效干扰片段。HEK293T包装干扰病毒并转染肝癌HepG2细胞株,200 mmol/L嘌呤霉素筛选2-3周,Western blot检测PXR表达。hPXR激动剂利福平处理PXR sh-RNA稳定干扰肝癌HepG2细胞株和Scramble对照细胞,抽提RNA并鉴定hPXR靶基因细胞色素P450 3A4(CYP3A4)的表达。结果:筛选出了PXR有效干扰片段,并获得了PXR信号通路有效敲低的HepG2慢病毒稳定干扰株。结论:成功构建了慢病毒介导的PXR sh-RNA稳定干扰HepG2细胞株。

摘要：目的:应用均匀设计法,定量分析海滩牵牛中东莨菪亭和橙皮素联用对冰醋酸所致小鼠扭体实验的镇痛效果。方法:设置5个水平的东莨菪亭(S)和橙皮素(H)联用比例和剂量,采用冰醋酸致小鼠扭体模型,观察不同组合的镇痛效果,综合数理分析结果,确定最优配方。结果:联合使用橙皮素194.5mg/kg和东莨菪亭15.36mg/kg对冰醋酸所致小鼠扭体实验可达到最佳的抑制作用。最佳剂量范围,H:175～215mg/kg;S:14～17mg/kg。结论:本实验采用均匀设计法确定了海滩牵牛中东莨菪亭和橙皮素联用对冰醋酸所致小鼠扭体实验的镇痛效果的最佳配比。均匀设计法可用于多药物联用的定量分析,但有一定的局限,其结果需经实验确证。