摘要：目的构建表达靶向抑制垂体瘤转化基因1(PTTG1)基因表达的RNA干扰载体microRNA,导入人脑胶质瘤细胞株U251中,研究靶向抑制PTTG1基因对U251细胞的凋亡诱导作用。方法以PTTG1为靶基因,根据pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体要求,设计针对PTTG1的microRNA序列,脂质体转染法将重组质粒转入U251细胞,采用荧光定量多聚酶链反应(PCR)以及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测干扰效果;膜联蛋白V与碘化丙啶(annexinV/PI)双色标记的流式细胞仪法检测microRNA诱导的细胞凋亡,碘化丙锭(PI)染色检测细胞周期阻滞。结果实时荧光定量PCR以及Western blot检测显示,PTTG1基因的mRNA转录水平以及蛋白水平的表达均得到显著抑制;转染后,流式细胞仪检测分析显示,PTTG1基因表达被抑制后,U251细胞凋亡率明显增高,细胞周期出现明显的G2/M阻滞。结论靶向PTTG1基因的重组microRNA干扰载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PTTG1介导的RNAi显著靶向抑制了PTTG1基因在人脑胶质瘤细胞中的表达,并明显地诱导了脑胶质瘤细胞发生凋亡和G2/M期细胞周期阻滞。

摘要：我院自1984年2月至1990年6月采用自行设计的夹板,手法复位固定治疗新鲜第一掌骨基底骨折或合并腕掌关节脱位36例,效果良好,现报告如下.改良夹板与固定方法夹板用软木质材料制成,分掌侧块和背侧块.掌侧块4×5cm,略呈马鞍状,凹侧有衬垫,以适应大鱼际部的外形;背侧块4×5cm,呈梯形,高1.5cm,凸出部为较厚的衬垫构成(图1)

摘要：为了解胶质瘤p16基因突变和蛋白丢失与其恶性程度的关系,我们用两种方法分别检测45例脑胶质瘤p16基因第2外显子的突变和蛋白丢失情况,结果报道如下对象和方法1.标本来源和DNA制备 45例脑胶质瘤标本取自我科手术标本。经病理学检查按WHO肿瘤分类标准:12例星形细胞瘤(WHO Ⅱ),18例间变性星形细胞瘤(WHO Ⅲ),15例胶质母细胞瘤(WHO Ⅳ)。每1标本分两份,一份置-70℃冰箱用于p16基因突变检测,一份石腊包埋用于p16蛋白丢失检测。每例取癌旁组织作为对照。DNA提取按常规方法进行。***引物及反应条件引物由北京医科大学设计合成。反应条件:94℃1分钟;用上。