摘要：目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰技术诱导小鼠树突状细胞OX40L基因沉默对调节性T细胞的影响. 方法 设计针对小鼠OX40L基因的RNA于扰序列,通过外源筛靶筛选出干扰效果最佳的序列.以293T为包装细胞,制备含OX40L的siRNA序列的慢病毒载体OX40L-RNAi-LV和阴性对照载体NC-GFP-LV.采用磁式分选器分离培养骨髓来源的小鼠树突状细胞（DCs）,以MOI为25进行转染,分别将转染OX40L-RNAi-LV（实验组）、转染NC-GFP-LV（阴性对照组）和未转染（空白对照组）的DCs与磁式分选器分选得到的CD4^＋CD25^＋T调节细胞共培养,6 d后通过流式细胞仪检测T调节细胞的增殖和凋亡情况. 结果外源筛靶筛选出干扰效果最佳的RNA干扰序列（靶序列为GCTCATACAAGAATGAGTA）,OX40L蛋白表达的抑制率为73.1%.感染复数为25时,慢病毒载体感染DCs的效率为86.4%.DCs与CD4^＋CD25^＋T调节细胞共培养后,实验组的凋亡细胞比例为8.7%,显著低于阴性对照组（20.1%）和空白对照组（19.8%）,F=244.22,P=0.000;而增殖细胞前体频率为38.3%,明显高于阴性对照组（24.5%）和空白对照组（22.9%）,F=95.40,P=0.000.结论 小鼠OX40L的siRNA慢病毒载体可以有效降低树突状细胞OX40L的表达,对体外培养的CD4＋CD25＋T调节细胞具有显著地促进增殖、减少凋亡的作用.

摘要：我们设计了一种小型猪部分肝切除后自体残余肝脏灌注模型，模拟活体肝脏移植的再灌注过程，观察切除不同比例肝脏再灌注后的肝功能和生存情况。一、材料与方法体质量为20～25奴小型猪。静脉吸入复合全身麻醉后，经上腹部横形切口，分离肝动脉、门静脉主干及供应各肝叶的血管分支和肝上、肝下下腔静脉；按实验设计切除部分肝脏后，从供应肝左叶的门静脉分支插管作为灌注液流人道，经肝下下腔静脉插管作为灌注液流出道，阻断第一、第二肝门，经门静脉插管注入低温保存液灌洗肝脏，肝周置冰屑辅助降温，灌注总量约1500ml；灌注完成后，将门静脉分支插管向下插入门静脉主干，与肝下下腔静脉插管用Y型管连接，经体外转流泵将血液自颈外静脉插管回流，维持转流时间在45～55min，以此模拟无肝期；转流结束后，血液回输并开放阻断，缝合肝下下腔静脉和门静脉分支插管处。术后监测猪心率及血压，及时复温及预防感染。