摘要：根据GenBank中的参考序列设计并合成引物序列，从pMDM13h中扩增带酶切住点和His—tag的基因序列；用HindⅢ和XhoⅠ双酶切PCR扩增产物和pcDNA3．0载体，连接构建真核表达重组质粒pc3M13h，利用PCR，双酶切和测序鉴定其正确性；重组质粒pc3M13h转染COS-7细胞，瞬时表达的转染细胞（96孔板）在转染36．48h后，应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学，分别检测pc3M13h在COS-7细胞培养上清液和细胞内的表达．结果表明，设计合成的引物成功扩增了带有酶切位点和His—tag的基因序列；成功构建了真核表达重组质粒pc3M13，双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学检测显示，pc3M13h重组质粒不但能够在COS-7细胞中进行表达，而且能够进行微量的分泌表达．