摘要：研究目的探讨肿瘤相关抗原的表达及在肿瘤免疫中的作用。研究设计用人Hela细胞株提取含热休克蛋白的ATP结合蛋白,制取单抗,分析相应热休克蛋白在肿瘤细胞株及人体肿瘤中的表达。研究对象 Hela、W14、Brash-2等肿瘤细胞株,WFB、BALB_3T_3正常细胞株,人食管、胃等癌组织。处理方法按Garsia法将提取的ATP结合蛋白免疫BALB/c小鼠,制取杂交瘤,所得单抗对肿瘤细胞株及人体肿瘤作免疫组化及流式细胞分析。结果获取一株稳定分泌IgM的杂交瘤H3F。H3F抗原具有热及化学诱导性,是一种分子量为90kD的热休克蛋白,可在多种肿瘤细胞株及人体肿瘤细胞表面表达,并与浸润性γδT淋巴细胞呈正相关系。H3F在正常细胞株及人体细胞表面阴性。结论 H3F为一种瘤相关抗原,可介异γδT淋巴细胞对肿瘤的免疫监视作用。

摘要：目的:在大肠杆菌中表达KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定基础。方法:根据GenBank中KOX12的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR的方法从肺癌细胞株中扩增得到KOX12片段,将它克隆到PcDNA3.1F2/FOXM1质粒,然后经BamHI和XhoI双酶切,得到修饰过的KOX12基因片段,构建原核表达质粒PQE30/KOX12,以大肠杆菌M15为宿主菌表达目的蛋白,并采用Ni-NTA agarose亲和层析对目的蛋白进行了纯化。结果:构建了PQE30/KOX12原核表达体系,并检测到KOX12蛋白的有效表达。结论:成功地构建了原核表达质粒PQE30/KOX12并表达了KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定了基础。