摘要：以红毛藻(Bangia fuscopurpurea Lyngb.)蛋白质为原料,采用木瓜蛋白酶酶解方法制备红毛藻抗氧化肽.以酶解产物对1,1-二苯基-2-苦味酰基自由基(DPPH?)清除率为指标,据单因素试验,采用正交试验设计优化酶解制备抗氧化肽工艺,并评价多肽的抗氧化活性.结果表明,木瓜蛋白酶酶解红毛藻蛋白制备多肽的最佳酶解工艺参数为:酶解温度50℃、酶解时间120 min、pH 6.0、酶底比为1250 U/g.在最佳酶解工艺条件下,红毛藻蛋白水解度为13.85%±0.29%,酶解产物对DPPH?清除率达到87.46%±0.76%.酶解产物具备一定的还原力,且对DPPH?和超氧阴离子自由基(O2-?)的半数清除浓度(IC50)分别为(0.4514±0.0033)mg/mL和(3.3612±0.0376)mg/mL.

摘要：本研究以菠萝(Ananas comosus (L.) Merrill)果实为材料提取总RNA并合成cDNA.根据菠萝质膜水通道蛋白基因(AcPIP2-4)序列(GenBank登录号:XM020240565.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR从果实cDNA中扩增AcPIP2-4的ORF序列,并将该序列亚克隆至原核表达载体pET32a(+).经酶切鉴定和序列分析,结果表明,原核表达重组载体pET32a(+)-AcPIP2-4构建成功.以重组载体pET32a(+)-AcPIP2-4质粒为模板,通过RT-PCR扩增AcPIP2-4的CDS序列,再将其亚克隆至载体pSP64 Poly(A)上.经酶切鉴定及序列分析,结果表明,重组载体pSP64 Poly(A)-AcPIP2-4构建成功.重组载体pET32a(+)-AcPIP2-4和pSP64 Poly(A)-AcPIP2-4的成功构建,为后续制备抗AcPIP2-4的抗体和AcPIP2-4 c的RNA,进而进行AcPIP2-4的组织表达和功能研究奠定基础.