摘要：对大连开拓者号钻井船上的钻井模块设计、建造、安装过程中所涉及的技术、生产流程、精度控制、吊装索具配置等问题进行研究,对该模块的设计与建造流程进行计算机三维模拟,并结合工厂的场地、起重和运输能力及模块完整性要求对模块进行合理、有效的分段划分,依据该模块的特点编制建造方案,有针对性地提出切实可行的精度控制工艺方法,从而保证了该模块能够精确合拢.

摘要：根据Gen Bank中绵羊促卵泡激素受体基因(FSHR)的mRNA序列(登录号:NM_001009289.1)设计引物,反转录PCR(RT-PCR)扩增蛋白编码区(CDs)区,以获取绵羊FSHR基因可变剪接体,并通过Western blot验证其在组织中的表达,通过免疫组织化学方法检测其在卵泡中的表达位置。结果表明,在绵羊卵巢中除了全长的、编码695个氨基酸的FSHR表达产物外,还鉴定到分别编码694个、633个、595个、582个和533个氨基酸的FSHR可变剪接形式的转录产物。在卵泡中主要以695(694)、633和595 3种转录本形式存在。但在颗粒细胞中绵羊促卵泡激素受体主要以经典分子即695个氨基酸的形式存在。在卵泡发育过程中,FSHR蛋白质含量发生变化:在初级卵泡中,FSHR主要在卵母细胞中表达,而不是在单层的颗粒细胞中表达,在次级卵泡中,FSHR在颗粒细胞和卵母细胞中均不表达,到三级卵泡(有腔卵泡)时,FSHR蛋白质在颗粒细胞中表达丰富。可见,绵羊FSHR基因虽然存在可变剪接体的结构,但其功能主要取决于经典型的695个氨基酸蛋白质分子,并且对初级卵泡的发育具有一定的作用。

摘要：目的:设计一种在X线检查过程中可代替人声喊话、自动播放的语音指令模块。方法:语音指令模块由语音模块、按钮开关、喇叭、小型扩音器、电源模块等用导线连接组成;语音指令采用专用软件合成。结果:该语音指令模块可以代替传统人声喊话下达指令的方式,实现由按钮开关触发播放所需的语音指令,指令标准、清晰、易懂、无干扰音,易于患者配合,提高了检查质量,减轻了检查人员的工作负担。结论:该模块的应用实现了X线检查语音指令清晰、标准的自动播放,解决了临床面临的难题,容易普及,具有较高的实用价值及社会价值。

摘要：为获得有效干扰绵羊BMPR-1B基因的shRNA干扰分子,从绵羊卵巢组织中扩增了1 515 bp BMPR-1B基因全长编码区cDNA序列,添加HA标签序列后,插入Plex-mcs慢病毒质粒,构建Plex-BMPR-1B慢病毒表达载体,转染HEK293细胞,并与2个包装质粒共转染293T细胞进行病毒包装,用获得的重组慢病毒感染HEK293细胞;同时,将7个干扰分子与Pll-LentiLox 3.7载体重组,并与3个包装质粒共转染293T细胞进行病毒包装,获得干扰分子的重组病毒颗粒。最后用干扰分子重组的病毒颗粒感染整合Plex-BMPR-1B的HEK293细胞,进行qRT-PCR和Western blot检测。结果显示:重组BMPR-1B蛋白质在稳定整合Plex-BMPR-1B的HEK293细胞系中获得了表达;研究中设计的7个shRNA分子能抑制绵羊BMPR-1B基因表达水平68.30%～99.86%,其中PLL-BMPR-1B-1306和PLL-BMPR-1B-1475干扰分子的干扰效果最好。

摘要：转基因动物的鉴定是转基因动物研究领域的重要内容。本文简要回顾了相关鉴定技术的研究进展 ,建立和完善了特异性PCR扩增及其产物酶切的转基因动物鉴定体系 ,在引物设计、PCR参数优化、设立内源性标记等方面作了进一步的改进 ,提高了PCR的特异性和可靠性。实验表明 ,PCR扩增及其产物酶切是一种准确、灵敏、简便。

摘要：旨在克隆绵羊抗苗勒管激素基因(oAMH)的全长编码区序列,并对其序列进行分析。以绵羊的卵泡颗粒细胞全RNA逆转录得到的cDNA为模板,参照牛的AMH cDNA序列设计兼并引物,对oAMH基因的全长编码区进行T载体克隆并测序,并对其进行生物信息学分析。根据预测的编码区氨基末端260氨基酸对应的序列设计表达引物,构建原核表达载体pET15b-oamh260,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。序列分析结果表明,获得的绵羊AMH基因序列全长1 797 bp(GenBank登录号:KC986978),完整开放阅读框为1 728 bp,共编码575个氨基酸,氨基末端24个氨基酸为信号肽序列,羧基末端区域TGFβ家族保守区,全序列与牛AMH的同源性为95.80%。SDS-PAGE结果显示,IPTG诱导表达的融合蛋白大小为30 000,与预期蛋白质大小一致。Western blot检测结果显示,该蛋白质为His融合蛋白。以上结果表明该试验成功克隆了绵羊AMH基因的完整编码区序列,构建了原核表达载体,在大肠杆菌中成功表达出目的融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

摘要：【目的】比较绵羊卵母细胞体外受精后卵裂快慢对胚胎发育潜能及移植怀孕率的影响。【方法】使用因卵巢粘连无法作为超排供体的成年杜泊母羊,常规激素诱导卵泡超数发育,手术或屠宰回收卵丘—卵母细胞复合体(COCs),进行体外成熟(IVM),体外受精(IVF)和体外培养(IVC)。分别统计受精24、36、48 h卵裂情况及第7天的囊胚率,并按实验设计进行移植,统计怀孕率。其中,受精24 h及之前卵裂的记为卵裂快组,受精24 h之后卵裂的胚胎记为卵裂慢组。【结果】(1)卵裂快组胚胎占总胚胎数比例达77.85%,极显著高于卵裂慢组的22.15%(P0.05);(4)卵裂慢组的早期胚胎移植两枚的怀孕率极显著高于移植单枚的结果(33.89%vs 11.67%,P0.05);(6)受精后24 h或48 h移植,对怀孕率没有影响;(7)从形态上无法判断早期胚胎的质量。【结论】绵羊体外早期胚胎,卵裂快组单枚移植,卵裂慢组双枚移植,囊胚单枚移植,能提高胚胎利用率。