摘要：土压平衡盾构机在黏土、粉质黏土及泥岩地层中掘进时,渣土碎屑在刀盘和盾构开挖面之间极易形成固体或半固体泥饼,一般需要对渣土进行改良。结合成都轨道交通18号线盾构隧道工程实际,采用室内试验的方法研究改良剂掺入后渣土注水率、泡沫剂浓度、泡沫注入率3个因素对渣土的和易性、压缩性和剪切性的影响,并提出中风化泥岩地层的渣土改良方案,获得在一定搅拌转速和搅拌时间情况下,泡沫剂溶液发泡能力和稳定性随浓度增加而提升的规律,提出中风化泥岩地层渣土注水率为30%、最佳浓度为3%,泡沫注入率为40%。依托工程采用改良方案施工后,盾构机千斤顶和刀盘扭矩有所减小,未出现结泥饼现象,掘进速率和土舱压力均有增加。

摘要：为提高牛奶中大肠杆菌的检测效率,简化分析流程,该文建立基于成簇的规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的牛奶中大肠杆菌快速检测体系。首先,构建CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated protein,CRISPR-Cas),CRISPR-Cas12a的重组表达质粒,并将其转化至BL21感受态细胞,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(lsopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达Cas12a蛋白。然后,通过麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)亲和层析、凝胶过滤层析等方法将Cas12a蛋白进行纯化。最后,设计靶向大肠杆菌16S rDNA目的片段的特异性CRISPR RNA (crRNA),将特异性的crRNA、大肠杆菌16S rDNA的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)胶纯化产物和纯化的Cas12a蛋白进行混合,建立CRISPR-Cas12a靶向切割体系。验证结果显示该体系可用于检测牛奶样品中的大肠杆菌。