摘要：本研究旨在设计针对牛链球菌和牛球虫的联合多表位疫苗.通过生物信息学筛选两种病原体的T/B细胞优势表位基因序列,串联拼接后引入霍乱毒素B亚单位(CTB)作为分子内佐剂,设计得到多表位重组抗原CARR(CTB-AMA1-RodA-RodA).经密码子优化后,将CARR基因克隆至pET28a(+)质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),成功构建了稳定的表达工程菌.SDS-PAGE显示工程菌可高效表达约90 kDa目标蛋白,Western blot验证表达蛋白能与抗CTB及抗牛链球菌抗体特异性结合,且20代内工程菌质粒保有率超80%.纯化后的CARR蛋白免疫蛋鸡,7 wk后ELISA检测显示特异性IgY抗体效价达1∶12800.体外中和实验证实,该抗体显著抑制牛链球菌生长,说明其具备功能性中和活性.结果表明,CARR重组蛋白可有效快速激发宿主体液免疫应答,是牛链球菌和牛球虫联合疫苗的有效候选抗原靶点.

摘要：为进一步规范三七的栽培管理,采用随机区组试验设计,按种苗重进行分级移栽,考察不同处理植株生长性状及皂苷含量差异。结果表明:种苗等级与株高、茎基粗、叶片大小、块根重、病株率及皂苷产量正相关,与出苗率、存苗率、根冠比及块根含水量负相关。生产中实行种苗分级移栽时宜选用种苗重大于1.5 g的Ⅰ级、Ⅱ级种苗。

摘要：为了实现烟草薄片废水中雌激素的生物降解,以高浓度雌二醇(Estradiol,E2)为唯一碳源,从烟草废水进水处的污泥中筛选到一株优势降解菌,在分离平板上呈乳白色、圆润、有光泽,菌落直径0.1~0.5 mm左右,革兰氏染色为阴性,16S rRNA鉴定为假单胞菌(Pseudomonas ***03)。在单因素试验的基础上,以E2的降解率为响应值,采用Box-Benhnken实验设计及响应面分析法对降解过程中的温度、pH、底物浓度进行优化。结果表明:温度对E2降解率影响最大,E2浓度次之,pH影响最小;降解E2的最优条件为:温度37℃、pH值7.0、E2浓度5.5 mg/L,以此参数测定E2的降解率为81.67%。将该菌株应用于烟草浓缩液和烟草薄片废水进水口E2的降解,7d后E2的降解率分别为31.21%、53.14%。研究获得的高效降解菌对E2降解能力强,效率高,可用于烟草薄片废水中雌激素的生物降解,对于甾体雌激素的降解及环境保护具有重要意义。