摘要：细菌外膜囊泡(OMVs)是革兰氏阴性菌以出芽方式分泌的一种蛋白脂质体,可通过基因工程改造成为外源大分子抗原蛋白的载体。成孔蛋白细胞溶素A(Cly A)可作为引导序列将C-端融合的外源蛋白质定位在菌体及其所分泌的OMVs外膜上。利用Cly A融合蛋白重组的OMVs可介导抗原呈递,制备疫苗。为验证这一假说,本研究拟以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为目的蛋白,采用重组技术,构建Cly A-EGFP融合蛋白表达载体,转化*** DH5α,获得Cly A-EGFP融合蛋白整合的重组细菌OMVs,探索Cly A/EGFP融合蛋白整合的OMVs作为一种制备新型疫苗载体的可行性。重组OMVs分别经蛋白酶K和/或EDTA处理后,蛋白质印迹分析显示,Cly A-EGFP融合蛋白有效地整合在重组的OMVs中,且EGFP呈现于表面。重组OMVs与小鼠巨噬细胞Raw264.7共同孵育后,以EGFP作为标记,荧光显微镜观察显示,OMVs可被巨噬细胞吞噬、摄取。进而,荧光显微镜及流式细胞术分析证明,重组的OMVs可被骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)有效摄取,并促进BMDCs表达CD86和CD80,说明重组的OMVs可激活树突状细胞,促进其成熟。本研究结果提示,利用Cly A融合特异目的蛋白整合的重组OMVs,可作为外源蛋白质的载体,介导抗原呈递作用,在设计与制备疫苗中具有潜在的应用价值。

摘要：科学认识、合理分析水域纳污能力变化对促进污染减排、实现水功能区限制纳污红线管理至关重要。本文以举水为研究对象,考虑长江水位变化影响,构建了举水下游河段一维水动力模型,并结合相关规范及文献资料,选取COD、NH3-N作为污染物控制指标,采用河流一维模型估算举水新洲区段各功能区容纳污染物的能力,在此基础上量化了三峡水库调蓄影响下各功能区纳污能力的变化情况。结果表明,三峡水库蓄水对各水功能区影响程度不同,上段保留区的纳污能力不受影响;保证率为75%、50%时,蓄水后与蓄水前相比,开发利用区与下段保留区纳污能力有所提高;保证率为90%时,蓄水后与蓄水前相比,开发利用区与下段保留区纳污能力有所降低,距离下游出口越近,对水功能区纳污能力的影响越大。

摘要：本论文为使用奈米流体(石墨烯)/超音波雾化微量润滑于微铣削加工SKH-9高速工具钢。主要利用石墨烯特殊的性质如绝佳的导热特性,降低加工时产生的切削温度,并减少刀具的磨损并提升微铣削加工产品品质,并使用自行开发设计之超音波雾化系统有效改善奈米流体中奈米粒子团聚现象,增加奈米粒子润滑效益。