摘要：目的分析我国药品集中带量采购(简称“集采”)背景下儿童药品使用现状,为后续儿童药品集采规则的设计提供参考。方法采用比较分析法,比较集采中选结果和儿童药品实际使用现状、儿童药品差比价和挂网价,分析儿童药品在集采和临床使用供应中的问题,并对儿童药品集采和定价规则的优化提出建议。结果与结论我国儿童药品需求增大,但已上市儿童药品供给不足(包括疾病领域覆盖不足、品种不足、儿童适宜剂型不足、儿童适宜规格不足等),且儿童药品研发较为困难。按照医保目录合并剂型集采后,部分儿童适宜剂型和规格无法中选,导致临床儿童用药短缺,相关企业研发生产儿童药品和参与挂网竞争的积极性降低。另外,在现有药品差比价规则下,未中选儿童药品的定价也存在过低的现象。建议在进行药品集采时,应基于儿童药品属性和适应证覆盖人群,对儿童专用药品进行单独分组集采;将未中选儿童适宜药品品规按一定比例折算入医疗机构约定采购量,并进一步优化儿童专用药品定价规则,确保该类药品有一定的利润空间,提高生产企业的研发供应意愿,从而保障儿童药品的使用供应。

摘要：本文建立了一种H7亚型禽流感病毒微滴式逆转录数字PCR方法,为H7亚型禽流感病毒核酸的定量检测和临床低浓度样品的诊断提供一种检测技术.根据H7亚型禽流感病毒的HA基因,设计了1对特异性的引物和探针,建立了H7亚型禽流感病毒的微滴式逆转录数字PCR方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价,并初步应用于临床样品的检测.结果为,该方法的最低检出限为3 copies/μL;与H1亚型、H3亚型、H6亚型禽流感病毒、新城疫病毒、鸡马立克氏病病毒、鸡传染性贫血病毒和鸡传染性法氏囊病病毒无交叉反应;检测12次200倍稀释的H7N9亚型禽流感病毒(Re-2株)的核酸,变异系数为3.38%;检测了30份临床样品,结果均为阴性.结果表明,该方法的敏感性高,特异性和重复性好,适用于H7亚型禽流感病毒的临床检测和标准物质的标定.

摘要：【目的】构建一种敏感性高、特异性强、重复性好的锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,为锦鲤疱疹病毒的定量检测和低浓度样品检测提供技术支持。【方法】参照靶位基因锦鲤疱疹病毒TK基因(GenBank登录号:KX609547.1)设计合成引物和探针,通过比对筛选出最佳引物探针,优化反应体系和退火温度,建立与实时荧光PCR方法的线性关系,并分析该方法的敏感性、特异性、重复性,最后应用于临床样品检测。【结果】当引物、探针浓度分别为900、300 nmol/L且退火温度为57℃时,建立的KHVddPCR扩增反应效率最高,阴阳性微滴分布界限最为明显。KHVddPCR敏感性强,检测限低至0.46拷贝/μL,在0~8.1×10^(4)拷贝/μL范围内,与实时荧光PCR检测结果的线性关系较佳(R2=0.9949)。检测变异系数低,批内变异系数为2.70%,批间变异系数为3.02%。与鲤浮肿病毒、鲫造血器官坏死病毒、真鲷虹彩病毒、草鱼出血病毒、罗非鱼湖病毒、十足目虹彩病毒、虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)和诺卡氏菌(Nocardia seriolae)等其他8种常见的水生动物疫病阳性样品无非特异性反应。在88份的临床样品检测中,阳性2份,阳性检出率为2.27%;在8份能力验证样品检测中,5份阳性,与能力验证满意结果一致,与实时荧光PCR方法和套式PCR方法检测结果一致。【结论】建立的锦鲤疱疹病毒ddPCR检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,可定量检测锦鲤疱疹病毒DNA,为锦鲤疱疹病毒的研究提供参考。