摘要：利用CRISPR/Cas9系统这一基于细菌核酸酶Cas9的新型基因编辑工具,可以在原核细胞和真核细胞中实现基因敲除的功能.首先使用CRISPR设计工具设计靶点,退火来制备sgRNA双链,用Bsm BⅠ酶切割gRNA质粒,构建Lenti CRISPRv2的重组质粒.通过U6启动子上的LKO1.5引物对每个菌落序列进行了测序验证,结果表明利用此新方法可以成功构建CRISPR/Cas9系统的Knock Out载体.

摘要：对深度学习理念下的高三物理专题复习课,以"带电粒子在叠加场中的运动"为例,用问题串的方式,让学生进行知识结构化建构,层层递进地学习,理解知识的内在联系,同时,层进式的习题改编变式,让深度学习真正进行.

摘要：【目的】建立能同时检测罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)和十足目虹彩病毒1(DIV1)的二重荧光定量PCR,为罗氏沼虾白尾病(WTD)及虹彩病毒病(DIV1D)的临床诊断和疫情监测提供更简便和高效的检测方法。【方法】分别根据MrNV-CP基因和DIV1-MCP基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,将目的基因片段分别克隆至pGM-T载体上制备重组质粒(pGM-T-CP^(MrNV)和pGM-T-MCP^(DIV1)),其中,pGM-T-CP^(MrNV)用Sal I酶切后经体外转录获得MrNV标准品RNA,pGM-T-MCP^(DIV1)则直接作为DIV1标准品DNA;以标准品为模板进行反应条件优化及标准曲线制定,建立可同时检测MrNV和DIV1的二重荧光定量PCR,并对该方法进行特异性、敏感性、重复性及临床应用试验。【结果】制备的MrNV标准品RNA和DIV1标准品DNA均具有很好的稳定性,可作为标准品和阳性对照使用;标准品起始模板范围为1.0×10^(1)~1.0×10^(8)Copies/反应时,建立的标准曲线具有良好线性关系。优化后的二重荧光定量PCR灵敏度高,对标准品的检测灵敏度可达10 Copies/反应,对罗氏沼虾组织样品的检测灵敏度约10 Copies/mg;与其他虾类常见病原无交叉反应,且整个检测过程仅需1 h左右。二重荧光定量PCR检测MrNV的组内试验和组间试验变异系数分别为0.31%~0.93%和0.96%~1.33%,检测DIV1的组内试验和组间试验变异系数分别为0.35%~0.81%和0.78%~1.04%。应用建立的二重荧光定量PCR和国内现行有效标准的套式PCR分别对117份临床样品进行MrNV和DIV1检测,结果显示对MrNV和DIV1检测的符合率分别为99.15%和97.44%,且二重荧光定量PCR检测目标病毒拷贝数较低样品时较套式PCR具有更高的灵敏度。2020年广西罗氏沼虾样品MrNV和DIV1的阳性检出率分别为6.0%和11.0%。【结论】结合TaqMan-MGB探针技术建立的二重荧光定量PCR能同时检测MrNV和DIV1,且具有灵敏度高、特异性强、重复性好、简便快速的特点,可为WTD和DIV1D的临床诊断及实时监测提供技术保障。

摘要：患儿因生性好动，给临床诊治和头皮静脉穿刺带来了许多不便，为了便于临床医生诊查和提高婴幼儿头皮静脉穿刺及抢救成功率，减轻护士的工作负担。我们将原来的输液治疗车改良成可移动的流动头皮静脉注射、抢救两用车。2008年4—12月，我们将该两用车应用于急诊抢救和婴幼儿头皮静脉输液操作，取得了良好的效果。

摘要：虚拟现实(VR)是互联网时代出现的一种新型人机交互技术,随着该技术的不断发展和日益成熟,虚拟现实技术也逐渐渗透到各行各业,通过模拟逼真场景,让人们产生一种身临其境的感觉.在变电站智能电气运维中引进虚拟现实技术,运维人员可以通过VR设备直观地观察到每一台电气设备的运行情况,实现了远程诊断和维护,从而极大地提高了电气设备运维工作效率.本文首先概述了智能电气运维中虚拟现实技术的应用特点和操作流程,其后就虚拟现实系统设计要点进行了简要分析.