摘要：目的探讨巢式PCR在献血者隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)检测中的应用,提高输血前血液筛查OBI的检出率。方法2021年7月至2022年8月在解放军济南血液中心的献血者,经血清学实验与核酸扩增实验共检出HBsAg-、NAT+的献血员37例,记录核酸扩增实验的Ct值,使用荧光定量PCR对HBV DNA进行定量检测;设计常规PCR引物与巢式PCR引物,分别使用常规PCR与巢式PCR扩增HBV S基因与preS基因,并对扩增结果进行基因测序。结果37例HBsAg-、NAT+献血者中有33例核酸检测Ct值处于灰区范围,荧光定量PCR检测HBV DNA值与核酸检测Ct值呈负相关性;37例HBsAg-、NAT+献血者使用常规PCR无法扩增出条带,改用巢式PCR后,34例可检测到HBV病毒S基因,28例可检测到HBV病毒preS基因;扩增条带经基因测序显示均为HBV基因组序列。结论HBsAg-、NAT+献血者血浆中HBV病毒载量极低;巢式PCR灵敏度高,可提高HBV病毒preS/S基因的检出率,对于OBI的输血前筛查及后续研究有一定应用价值。