摘要：目的:构建人表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,并建立稳定干扰EGFL7基因表达的喉癌细胞亚系,为研究EGFL7蛋白在喉癌发生发展中的功能奠定基础。方法:针对人EGFL7基因序列,设计特异性RNAi靶序列,与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR线性载体定向连接,得到的阳性重组子再与pLenti6.3-MCS/V5-DEST慢病毒载体进行重组,获得真核表达慢病毒干扰载体。在POLOdelivererTM3000介导下将慢病毒包装质粒和EGFL7基因重组慢病毒载体导入293T细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人喉癌细胞HEp-2,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰EGFL7基因的细胞亚系。结果:成功构建EGFL7 pLenti6.3-EGFL7-miR真核表达慢病毒干扰载体并获得相应慢病毒,经测定病毒滴度为5×1011TU/L,实时荧光定量PCR证实pLenti6.3-EGFL7-miR慢病毒载体对喉癌细胞HEp-2 EGFL7基因的沉默效率为97%。结论:成功构建人EGFL7基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得EGFL7基因稳定干扰的喉癌细胞亚系。

摘要：目的:探讨影响支撑喉镜显微手术声门区暴露困难的相关因素,为术前评估提供参考。方法:采取前瞻性研究设计的方法,选取90例因声带疾病(包括声带息肉、声带小结、声带囊肿、喉乳头状瘤等)接受支撑喉镜显微手术的患者,术前采集可能影响声门区暴露的相关临床数据,术中记录患者声门区暴露情况,建立数据库,统计分析影响支撑喉镜显微手术声门区暴露困难的相关因素。结果:单因素分析显示年龄(P=0.038)、Cormack-Lehane评分(P=0.007)、最大张口间距(P=0.007)、过伸位颏舌距(P=0.033)、过伸位颏甲距(P=0.014)、过伸位垂直颏甲距(P=0.042)、过伸位颏胸距(P=0.01)和颈部屈伸度(P=0.003)与声门区暴露困难相关;Logistic多元线性回归分析显示,Cormack-Lehane评分(P=0.003)、最大张口间距(P=0.001)和颈部屈伸度(P=0.002)是与声门区暴露困难相关的独立危险因素。结论:患者术前间接喉镜检查Cormack-Lehane评分、最大张口间距和颈部屈伸度在一定程度上可预测支撑喉镜显微手术声门区暴露情况,术前可结合这些指标加强评估、防范和减少手术并发症的发生。